芝麻是一种常见的食品过敏原,容易引起过敏反应。为了保障出口食品的质量和安全,需要对其中的芝麻进行检测。本标准介绍了一种基于LAMP技术的芝麻检测方法。
LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)技术是一种新型的核酸扩增技术,具有高灵敏度、高特异性、高效率、简便快速等优点。该技术不需要PCR仪器,只需要一个水浴或恒温器即可完成扩增反应。因此,LAMP技术逐渐成为食品安全检测领域的研究热点。
本标准中,芝麻的LAMP检测方法主要包括样品制备、DNA提取、LAMP扩增反应、结果判定等步骤。具体操作方法如下:
1. 样品制备
将待检样品取适量,加入适量的PBS缓冲液,混匀后离心沉淀,去除上清液,留下沉淀物备用。
2. DNA提取
将沉淀物加入适量的DNA提取试剂,按照试剂盒说明书进行DNA提取。提取后的DNA溶液可直接用于LAMP扩增反应。
3. LAMP扩增反应
将提取的DNA溶液加入LAMP反应体系中,进行扩增反应。反应体系中包括LAMP引物、Bst DNA聚合酶、dNTPs等。反应体系的具体配方和反应条件详见本标准。
4. 结果判定
LAMP扩增反应后,观察反应管中是否出现白色沉淀物,或者使用荧光染料进行染色观察。若出现白色沉淀物或荧光信号,则说明样品中存在芝麻DNA,即检测结果为阳性;若未出现白色沉淀物或荧光信号,则说明样品中不存在芝麻DNA,即检测结果为阴性。
本标准中,还介绍了LAMP扩增反应的优化方法、检测灵敏度、特异性等内容。该方法具有操作简便、灵敏度高、特异性好等优点,适用于各类食品中芝麻的检测。
相关标准
- GB/T 5009.156-2016 食品中芝麻的检验
- GB/T 22487-2008 食品安全国家标准 食品中过敏原的检测方法
- SN/T 4419.1-2016 出口食品常见过敏原LAMP系列检测方法 第1部分:总则
- SN/T 4419.2-2016 出口食品常见过敏原LAMP系列检测方法 第2部分:蛋白质
- SN/T 4419.3-2016 出口食品常见过敏原LAMP系列检测方法 第3部分:坚果