SN/T 4466-2016
国境口岸中东呼吸综合征冠状病毒实时荧光RT-PCR检测方法
发布时间:2016-03-09 实施时间:2016-10-01


中东呼吸综合征(MERS)是一种由中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)引起的病毒性呼吸道疾病。该病毒首次在2012年在沙特阿拉伯被发现,目前已在中东、非洲和亚洲等地区传播。MERS-CoV是一种单股正链RNA病毒,属于冠状病毒科,与SARS-CoV和新型冠状病毒(SARS-CoV-2)有关。

实时荧光RT-PCR是一种高灵敏度、高特异性的检测方法,已被广泛应用于病毒检测。本标准规定了MERS-CoV实时荧光RT-PCR检测方法,包括样品采集、核酸提取、RT-PCR反应和结果判读等步骤。

具体步骤如下:

1.样品采集

样品采集应在Biosafety Level 3实验室中进行。采集样品包括呼吸道分泌物、血液、尿液、粪便等。采集后应立即送至实验室进行处理。

2.核酸提取

核酸提取应使用商用核酸提取试剂盒,按照说明书进行操作。提取后的核酸应立即进行RT-PCR反应。

3.RT-PCR反应

RT-PCR反应应使用商用实时荧光RT-PCR试剂盒,按照说明书进行操作。反应条件包括反应体系、反应程序和反应结果判读等。

4.结果判读

根据实时荧光信号的阈值周期数(Ct值)和阳性对照的Ct值,判断样品是否为阳性。阳性样品应进行二次确认。

相关标准:
1. GB/T 21415-2008 中华人民共和国国境口岸卫生检疫规程
2. GB/T 21416-2008 中华人民共和国国境口岸动物检疫规程
3. GB/T 21417-2008 中华人民共和国国境口岸植物检疫规程
4. GB/T 21418-2008 中华人民共和国国境口岸检验检疫现场处理规程
5. GB/T 21419-2008 中华人民共和国国境口岸检验检疫现场设施规程