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土拉热弗朗西丝菌是一种由蜱传播的病原体，可引起人和动物的土拉热病。土拉热病是一种严重的传染病，对人和动物的健康造成威胁。为了保障国境口岸的动植物检验检疫工作，需要对进口动物、动物产品、植物及其产品等进行检测，以防止土拉热病的传播。本标准规定了国境口岸土拉热弗朗西丝菌荧光PCR检测方法，以提高检测效率和准确性。

1.范围
本标准适用于国境口岸对进口动物、动物产品、植物及其产品等进行检验检疫时，对土拉热弗朗西丝菌进行检测。

2.检测原理
本标准采用荧光PCR技术，通过特异性引物和探针扩增和检测土拉热弗朗西丝菌的16S rRNA基因序列。

3.试剂和仪器
3.1 试剂
本标准所需试剂包括PCR试剂盒、DNA提取试剂盒、阳性对照菌株、负性对照菌株等。
3.2 仪器
本标准所需仪器包括PCR仪、荧光定量PCR仪、生物安全柜等。

4.样品处理
4.1 样品采集
样品采集应按照相关标准进行，避免污染和交叉感染。
4.2 样品处理
样品处理应按照相关标准进行，避免DNA污染和降解。

5.检测步骤
5.1 DNA提取
样品DNA提取应按照DNA提取试剂盒说明书进行。
5.2 PCR扩增
PCR扩增应按照PCR试剂盒说明书进行。
5.3 荧光定量PCR检测
荧光定量PCR检测应按照荧光定量PCR仪说明书进行。

6.结果判定
6.1 阳性判定
荧光定量PCR检测结果中，荧光曲线呈S型，且荧光信号值高于阈值，即为阳性。
6.2 阴性判定
荧光定量PCR检测结果中，荧光曲线呈直线或平台状，且荧光信号值低于阈值，即为阴性。

7.结果报告
7.1 阳性样品
阳性样品应及时通报相关部门，并按照相关标准进行处理。
7.2 阴性样品
阴性样品可放行或按照相关标准进行处理。

相关标准：
GB/T 4789.1-2016 食品微生物学通则
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范
GB/T 191-2008 包装、储运和保管图形符号
GB/T 6688-2008 分析化学实验室安全规范
GB/T 21415.1-2015 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量