施马伦贝格病是一种由施马伦贝格病毒引起的急性传染病,主要感染家畜和野生动物,对动物健康和人类健康都有一定的危害。为了保障动物和人类的健康,需要对施马伦贝格病进行检疫监测和防控工作。本标准就是为了规范施马伦贝格病检疫的技术要求和检测方法。
1.术语和定义
本标准中使用的术语和定义如下:
1.1 施马伦贝格病:由施马伦贝格病毒引起的急性传染病。
1.2 检疫:对动物、动物产品、动物源性制品、植物及其产品等进行检查、监测、隔离、治疗、销毁等措施,以防止疫病的传播和扩散。
1.3 检测:对施马伦贝格病进行实验室检测,以确定动物是否感染施马伦贝格病毒。
2.检测方法
2.1 标本采集
2.1.1 血清标本采集:采用无菌注射器采集静脉血,放置于离心管中,离心后取上清液作为血清标本。
2.1.2 组织标本采集:采用无菌手术刀或钳子取组织标本,放置于离心管中,离心后取上清液作为组织标本。
2.2 血清学检测
2.2.1 微量凝集试验(MAT):采用双倍补体法,检测血清中施马伦贝格病毒抗体的含量。
2.2.2 酶联免疫吸附试验(ELISA):采用酶标仪检测血清中施马伦贝格病毒抗体的含量。
2.3 分子生物学检测
2.3.1 聚合酶链式反应(PCR):采用PCR技术检测组织标本中施马伦贝格病毒的核酸。
2.3.2 实时荧光定量PCR(qPCR):采用qPCR技术检测血清和组织标本中施马伦贝格病毒的核酸。
3.检测结果的判定
3.1 血清学检测
3.1.1 MAT检测结果:抗体滴度≥1:1000为阳性,抗体滴度<1:1000为阴性。
3.1.2 ELISA检测结果:OD值≥0.3为阳性,OD值<0.3为阴性。
3.2 分子生物学检测
3.2.1 PCR检测结果:出现特异性条带为阳性,未出现特异性条带为阴性。
3.2.2 qPCR检测结果:荧光信号曲线呈S型为阳性,未出现S型曲线为阴性。
4.检测质量控制
4.1 试剂质量控制:使用的试剂应符合国家标准或行业标准。
4.2 标本质量控制:采集的标本应符合规范要求,避免污染和误差。
4.3 检测设备质量控制:检测设备应符合国家标准或行业标准,定期进行维护和校准。
4.4 检测人员质量控制:检测人员应具备相关专业知识和技能,定期进行培训和考核。
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