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国境口岸是国家的门户，为了保障国家的口岸卫生安全，需要对进出口的食品、水产品等进行检测。霍乱弧菌和拟态弧菌是引起肠道疾病的重要病原菌，对于这两种病原菌的检测，本标准提供了一种双重荧光PCR检测方法。

该方法采用特异性引物和荧光探针，通过PCR扩增和荧光信号检测，实现对霍乱弧菌和拟态弧菌的同时检测。该方法具有高灵敏度、高特异性、快速、简便等优点，适用于国境口岸对食品、水产品等样品的检测。

具体操作步骤如下：

1. 样品处理：将样品进行预处理，如过滤、浓缩等，以提高病原菌的检出率。

2. DNA提取：采用商用DNA提取试剂盒或自制试剂盒提取样品中的DNA。

3. PCR扩增：将提取的DNA作为模板，使用特异性引物和荧光探针进行PCR扩增。

4. 荧光信号检测：使用荧光定量PCR仪检测PCR产物的荧光信号，判断样品中是否存在霍乱弧菌和拟态弧菌。

本标准还对实验室设备、试剂、质控等方面进行了详细的要求和说明，以确保检测结果的准确性和可靠性。

相关标准：
1. GB 4789.41-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 拟态弧菌检验
2. GB 4789.42-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 霍乱弧菌检验
3. GB 4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠杆菌检验
4. GB 4789.4-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落计数法
5. GB 4789.5-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 霉菌和酵母菌计数法