SN/T 4280.3-2016
国境口岸澳洲大蠊形态及DNA条形码鉴定方法
发布时间:2016-08-23 实施时间:2017-03-01
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澳洲大蠊是一种外来有害生物,对我国的生态环境和农业生产造成了严重的威胁。为了及时发现和防控澳洲大蠊的入侵,需要对其进行准确的鉴定。本标准旨在规范国境口岸对澳洲大蠊进行形态及DNA条形码鉴定的方法。
1.样品采集
样品采集应选择活体成虫,采集时应注意不损伤样品,避免样品受到污染。采集后应立即送至实验室进行处理。
2.形态鉴定
形态鉴定应根据澳洲大蠊的形态特征进行,包括体长、体宽、体高、触角、翅膀等方面。形态鉴定应由具有相关经验的专业人员进行。
3.DNA提取
DNA提取应采用适当的方法,如CTAB法、酚/氯仿法等。提取的DNA应具有一定的纯度和完整性,以保证后续的PCR扩增和测序。
4.PCR扩增
PCR扩增应选择适当的引物,如COI、ITS等。PCR反应体系应根据引物的特性进行优化,以保证扩增效率和特异性。PCR扩增后应进行凝胶电泳检测,确认扩增产物的大小和纯度。
5.测序和序列分析
PCR扩增产物应进行双向测序,测序结果应进行序列比对和分析。序列比对应选择适当的软件,如BLAST等。序列分析应包括序列长度、碱基组成、SNP等方面。
相关标准:
GB/T 19423-2004 生物技术实验室通用要求
GB/T 19424-2004 生物技术实验室质量控制要求
GB/T 19425-2004 生物技术实验室安全要求
GB/T 19426-2004 生物技术实验室数据管理要求
GB/T 19427-2004 生物技术实验室设备要求