致泻大肠埃希氏菌是一种常见的肠道病原菌，能够引起人和动物的肠道感染，导致腹泻、腹痛等症状。在微生物菌剂中，如果含有致泻大肠埃希氏菌，可能会对环境和人体健康造成危害。因此，对于入境环保用微生物菌剂，需要进行致泻大肠埃希氏菌的检测。

本标准适用于入境环保用微生物菌剂中致泻大肠埃希氏菌的检测。检测方法采用PCR技术，通过检测致泻大肠埃希氏菌的特异性基因，确定微生物菌剂中是否含有致泻大肠埃希氏菌。

具体检测步骤如下：

1.样品制备：将微生物菌剂样品加入适量的缓冲液中，进行均匀混合，制备样品。

2.提取DNA：采用商用DNA提取试剂盒，按照说明书提取微生物菌剂样品中的DNA。

3.PCR扩增：采用特异性引物，进行PCR扩增。PCR反应体系为25μL，包括10×PCR缓冲液2.5μL、2.5mM dNTPs混合液1μL、10μM引物混合液1μL、Taq DNA聚合酶0.25μL、模板DNA 2μL、去离子水18.25μL。PCR反应条件为：95℃预变性5min，95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，共35个循环，72℃延伸10min，4℃保持。

4.检测结果分析：将PCR扩增产物进行凝胶电泳，观察是否有目标条带出现。如果出现目标条带，说明微生物菌剂中含有致泻大肠埃希氏菌。

本标准的实施可以保证入境环保用微生物菌剂的质量和安全性，对于保护环境和人体健康具有重要意义。

相关标准
GB/T 4789.3-2016 食品安全国家标准 微生物学检验 第3部分：肠道致病菌检验
GB/T 4789.4-2016 食品安全国家标准 微生物学检验 第4部分：食品中大肠菌群检验
GB/T 4789.5-2016 食品安全国家标准 微生物学检验 第5部分：食品中金黄色葡萄球菌检验
GB/T 4789.10-2016 食品安全国家标准 微生物学检验 第10部分：食品中沙门氏菌检验
GB/T 4789.11-2016 食品安全国家标准 微生物学检验 第11部分：食品中耐热性大肠菌群检验