瓜蔓枯病是由瓜蔓枯病菌引起的一种病害，主要危害瓜类植物，如西瓜、甜瓜、黄瓜等。该病害具有极强的传染性和破坏性，严重影响瓜类植物的生长和产量。为了保障瓜类植物的生产和贸易安全，需要对瓜蔓枯病菌进行检疫鉴定。本标准就是为了规范瓜蔓枯病菌检疫鉴定方法而制定的。

1 范围
本标准适用于瓜类植物及其种子、苗木等检疫工作。

2 规定
2.1 样品采集
2.1.1 采样时间：在瓜类植物生长期内，发现疑似瓜蔓枯病的病株或病果时，应立即采集样品。
2.1.2 采样方法：采用无菌器具采集病株或病果样品，避免污染。
2.1.3 样品数量：每个样品应采集3-5个病株或病果，每个样品不少于100g。
2.2 样品处理
2.2.1 样品消毒：将采集的样品在70%的乙醇中浸泡5-10秒，然后在无菌水中反复漂洗3次，去除表面的细菌和杂质。
2.2.2 样品切片：将样品切成2-3mm的薄片，取其中的病斑部位作为检测样品。
2.3 菌种分离
2.3.1 培养基制备：制备瓜蔓枯病菌专用培养基，具体配方详见附录A。
2.3.2 菌种分离：将样品切片接种在瓜蔓枯病菌专用培养基上，放置在28℃左右的恒温培养箱中，培养3-5天，直至菌落生长良好。
2.4 鉴定
2.4.1 形态学鉴定：观察菌落形态、菌丝形态、孢子形态等特征，与瓜蔓枯病菌形态学特征进行比对。
2.4.2 生理生化鉴定：进行氧化酶、过氧化氢酶、葡萄糖酸盐等生理生化试验，与瓜蔓枯病菌生理生化特征进行比对。
2.4.3 分子生物学鉴定：采用PCR技术进行分子生物学鉴定，与瓜蔓枯病菌分子生物学特征进行比对。

相关标准
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