SN/T 4976-2017
陈旧昆虫标本的DNA提取 磁珠方法
发布时间:2017-11-07 实施时间:2018-06-01


DNA提取是分子生物学研究的基础,而对于陈旧昆虫标本的DNA提取则更具有挑战性。陈旧昆虫标本中DNA的质量和数量都受到很大的限制,因此需要一种高效、可靠的DNA提取方法。本标准介绍了一种基于磁珠的DNA提取方法,可以有效地提取陈旧昆虫标本中的DNA。

1.范围
本标准适用于陈旧昆虫标本的DNA提取磁珠方法。

2.方法
2.1 样本处理
将陈旧昆虫标本取出,去除外壳和肌肉组织,留下头部和胸部。将头部和胸部放入1.5mL离心管中,加入500μL的提取缓冲液,用匀浆器均匀混合,离心1min,将上清转移到新的离心管中。

2.2 DNA提取
加入磁珠,用磁珠悬浮液混合,离心1min,将上清转移到新的离心管中。加入洗涤缓冲液,用匀浆器均匀混合,离心1min,将上清转移到新的离心管中。重复洗涤步骤,直到洗涤液中不再有明显的颜色。最后加入洗涤缓冲液,离心1min,将上清转移到新的离心管中。加入洗涤缓冲液,用匀浆器均匀混合,离心1min,将上清转移到新的离心管中。加入洗涤缓冲液,用匀浆器均匀混合,离心1min,将上清转移到新的离心管中。加入洗涤缓冲液,用匀浆器均匀混合,离心1min,将上清转移到新的离心管中。最后加入洗涤缓冲液,用匀浆器均匀混合,离心1min,将上清转移到新的离心管中。

2.3 DNA溶解
加入适量的洗涤缓冲液,用匀浆器均匀混合,离心1min,将上清转移到新的离心管中。加入适量的洗涤缓冲液,用匀浆器均匀混合,离心1min,将上清转移到新的离心管中。最后加入适量的洗涤缓冲液,用匀浆器均匀混合,离心1min,将上清转移到新的离心管中。

3.结果计算
将DNA样品用琼脂糖凝胶电泳进行检测,根据DNA条带的大小和清晰度来判断DNA的质量和数量。

相关标准
GB/T 21415-2008 昆虫标本制备方法
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