SN/T 2565-2010
食品中志贺氏菌分群检测 MPCR-DHPLC法
发布时间:2010-05-27 实施时间:2010-12-01
志贺氏菌是一种常见的肠道病原菌,可引起急性肠炎、溶血性尿毒症综合征等疾病。由于志贺氏菌的毒力和传播能力较强,因此对其的检测和监测一直是食品安全领域的重要任务之一。
本标准采用MPCR-DHPLC法对食品中的志贺氏菌进行分群检测。该方法基于多重PCR技术,通过扩增志贺氏菌的O抗原和H抗原基因片段,然后利用DHPLC技术对PCR产物进行分离和检测,最终确定志贺氏菌的分群类型。
具体操作步骤如下:
1. 样品制备:将食品样品加入PBS缓冲液中,进行均质处理,然后离心沉淀,取上清液进行后续操作。
2. DNA提取:采用商用DNA提取试剂盒对样品中的DNA进行提取。
3. MPCR扩增:采用多重PCR技术,扩增志贺氏菌的O抗原和H抗原基因片段。
4. DHPLC分离:采用DHPLC技术对PCR产物进行分离和检测,最终确定志贺氏菌的分群类型。
本标准还对实验室设备、试剂、质控等方面进行了详细的要求和说明,以确保检测结果的准确性和可靠性。
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