弯曲菌是一种常见的食源性病原菌,能够引起人类和动物的肠胃疾病。为了保障进出口食品的安全,需要对其中的弯曲菌进行检测。本标准旨在规定进出口食品中弯曲菌的检测方法,以确保食品的安全性。
1.范围
本标准适用于进出口食品中弯曲菌的检测。
2.检测原理
本标准采用PCR技术检测进出口食品中的弯曲菌。首先,将样品中的DNA提取出来,然后使用特异性引物扩增目标基因片段,最后通过凝胶电泳检测扩增产物。
3.检测方法
3.1 样品的准备
将样品取适量,加入生理盐水中,进行混合均匀,然后进行离心,去除上清液,留下沉淀。
3.2 DNA的提取
将沉淀物加入提取液中,进行混合均匀,然后进行离心,去除上清液,留下沉淀。将沉淀物加入洗涤液中,进行混合均匀,然后进行离心,去除上清液,留下沉淀。最后,将沉淀物加入洗涤液中,进行混合均匀,然后进行离心,去除上清液,留下沉淀。将沉淀物加入去离子水中,进行混合均匀,最后得到DNA提取物。
3.3 PCR扩增
将DNA提取物加入PCR反应体系中,进行PCR扩增。PCR反应体系的组成为:模板DNA、引物、dNTPs、Taq聚合酶、缓冲液。PCR反应条件为:95℃预变性5min,95℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸1min,共35个循环。最后,将PCR产物进行凝胶电泳检测。
4.结果判定
样品中出现目标基因片段的扩增产物,且大小符合预期,即为阳性结果;否则为阴性结果。
5.质量控制
5.1 试剂的质量控制
使用的试剂应符合国家相关标准。
5.2 仪器的质量控制
使用的仪器应符合国家相关标准。
5.3 检测人员的质量控制
检测人员应具有相关的专业知识和技能,且应定期进行培训和考核。
相关标准
GB/T 4789.3-2016 食品微生物学检验 嗜酸曲菌、嗜碱曲菌检验
GB/T 4789.4-2016 食品微生物学检验 肠道沙门氏菌检验
GB/T 4789.5-2016 食品微生物学检验 肠道致病菌群检验
GB/T 4789.7-2016 食品微生物学检验 耐热性大肠杆菌检验
GB/T 4789.10-2016 食品微生物学检验 菌落总数检验