SN/T 2754.2-2011
出口食品中致病菌环介导恒温扩增(LAMP)检测方法 第2部分:大肠杆菌O157
发布时间:2011-02-25 实施时间:2011-07-01


大肠杆菌O157是一种常见的致病菌,能够引起人类和动物的肠道感染。在出口食品中,大肠杆菌O157的检测非常重要,以保障食品安全。本标准提供了一种可靠的检测方法,即环介导恒温扩增(LAMP)。

LAMP技术是一种新型的核酸扩增技术,具有高灵敏度、高特异性、高效率和简便易行等优点。本标准中所使用的LAMP方法是基于6个特异性引物的反应,能够在恒温下(60-65℃)快速扩增目标DNA序列。该方法不需要昂贵的设备和复杂的操作步骤,适用于实验室和现场检测。

本标准中所使用的LAMP方法需要提取出口食品中的DNA,并进行反应体系的制备。反应体系中包括LAMP反应混合液、DNA模板和水。反应混合液中包括Bst DNA聚合酶、dNTPs、MgSO4、Betaine、引物混合物等。反应体系的制备需要严格按照标准中的要求进行,以保证检测结果的准确性和可靠性。

本标准中所使用的LAMP方法需要进行阳性和阴性对照实验,以验证反应体系的可靠性和特异性。阳性对照实验需要使用已知含有大肠杆菌O157 DNA的样品,而阴性对照实验则需要使用不含大肠杆菌O157 DNA的样品。在实验过程中,需要进行反应体系的优化和反应时间的控制,以保证检测结果的准确性和可靠性。

本标准中所使用的LAMP方法的检测结果可以通过肉眼观察或荧光检测来判断。在肉眼观察中,阳性样品会呈现出乳白色或淡黄色的沉淀,而阴性样品则不会有沉淀。在荧光检测中,阳性样品会发出荧光信号,而阴性样品则不会有荧光信号。荧光检测可以进一步提高检测的灵敏度和特异性。

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