一、范围
本标准规定了液相色谱-质谱/质谱法测定出口植物源性食品中环己烯酮类除草剂（包括环己烯酮、草铵膦、草甘膦、草乐膦、草胺膦、草药膦、草药胺膦、草药乐膦、草药甘膦、草药氟草膦、草药氟乐膦、草药氟甘膦、草药氟胺膦、草药氟草胺膦、草药氟草甘膦）残留量的方法。

二、方法原理
样品经乙腈提取，经固相萃取柱净化后，采用液相色谱-质谱/质谱法进行检测。

三、仪器设备和试剂
1. 仪器设备
（1）液相色谱-质谱/质谱仪：Agilent 6410B；
（2）色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）；
（3）固相萃取柱：Agilent Bond Elut C18（500 mg，6 mL）；
（4）离心机：Epporf 5415D；
（5）超声波清洗器：Branson 3510；
（6）pH计：Mettler Toledo；
（7）电子天平：Mettler Toledo；
（8）移液器：Epporf Research plus；
（9）微孔过滤膜：0.22 μm。

2. 试剂
（1）环己烯酮、草铵膦、草甘膦、草乐膦、草胺膦、草药膦、草药胺膦、草药乐膦、草药甘膦、草药氟草膦、草药氟乐膦、草药氟甘膦、草药氟胺膦、草药氟草胺膦、草药氟草甘膦标准品：纯度≥98%；
（2）乙腈：色谱纯；
（3）甲酸：色谱纯；
（4）水：超纯水。

四、样品处理
1. 样品的准备
样品应当按照GB/T 5009.3的规定进行样品的制备。

2. 样品的提取
取样品5 g，加入50 mL乙腈，超声提取10 min，离心10 min，取上清液过滤，取2 mL上清液加入10 mL离心管中，加入5 g无水硫酸钠，振荡1 min，离心5 min，取上清液过滤，取2 mL上清液加入10 mL离心管中，加入1 mL甲酸，振荡1 min，离心5 min，取上清液过滤，即为待测样品。

3. 样品的净化
取Bond Elut C18固相萃取柱，用5 mL乙腈预洗，用5 mL水平衡，将待测样品通过固相萃取柱，用5 mL水洗脱，用5 mL乙腈洗脱，将洗脱液旋干，用1 mL甲酸-乙腈（1:1）重溶，即为待测液。

五、仪器操作条件
1. 液相色谱-质谱/质谱仪条件
（1）离子源：电喷雾离子源（ESI）；
（2）离子极性：正离子模式；
（3）碰撞能量：20 eV；
（4）离子源温度：350℃；
（5）气体流量：10 L/min；
（6）毛细管电压：4.0 kV；
（7）毛细管温度：300℃；
（8）进样量：10 μL。

2. 色谱条件
（1）流动相A：0.1%甲酸水溶液；
（2）流动相B：乙腈；
（3）梯度洗脱程序：0-2 min，5% B；2-5 min，5%-95% B；5-7 min，95% B；7-7.1 min，95%-5% B；7.1-10 min，5% B；
（4）流速：0.3 mL/min；
（5）柱温：30℃。

六、质量控制
1. 标准曲线
取环己烯酮、草铵膦、草甘膦、草乐膦、草胺膦、草药膦、草药胺膦、草药乐膦、草药甘膦、草药氟草膦、草药氟乐膦、草药氟甘膦、草药氟胺膦、草药氟草胺膦、草药氟草甘膦标准品各取一定量，制成不同浓度的混合标准溶液，用该标准溶液进行外标法建立标准曲线。

2. 样品的加标回收率
取一定量的样品，加入一定量的环己烯酮、草铵膦、草甘膦、草乐膦、草胺膦、草药膦、草药胺膦、草药乐膦、草药甘膦、草药氟草膦、草药氟乐膦、草药氟甘膦、草药氟胺膦、草药氟草胺膦、草药氟草甘膦标准品，进行提取、净化、检测，计算加标回收率。

七、结果计算
1. 计算公式
样品中环己烯酮类除草剂的质量浓度（mg/kg）=（样品中环己烯酮类除草剂的峰面积/标准曲线斜率）×稀释倍数

2. 检出限
环己烯酮、草铵膦、草甘膦、草乐膦、草胺膦、草药膦、草药胺膦、草药乐膦、草药甘膦、草药氟草膦、草药氟乐膦、草药氟甘膦、草药氟胺膦、草药氟草胺膦、草药氟草甘膦的检出限均为0.01 mg/kg。

八、质量保证和控制
1. 仪器的校准和质量控制
（1）每天使用前进行仪器的校准；
（2）每批次样品检测前进行仪器的质量控制。

2. 样品的质量控制
（1）每批次样品检测前进行样品的质量控制；
（2）每批次样品检测中加入空白样品和加标样品进行质量控制。

九、报告内容
1. 检测结果
报告样品中环己烯酮类除草剂的质量浓度（mg/kg）。

2. 报告格式
报告应当包括样品编号、检测日期、检测方法、检测结果等内容。

相关标准
GB/T 5009.3-2016 食品中农药残留量的测定 气相色谱法

GB/T 5009.199-2017 食品中草甘膦残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

GB/T 5009.201-2017 食品中草铵膦残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

GB/T 5009.202-2017 食品中草胺膦残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

GB/T 5009.203-2017 食品中草药膦残留量的测定 液相色谱-串联质谱法