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硝基呋喃代谢物是一种常见的食品污染物,其对人体健康有一定的危害。因此,对于出口动物源食品中硝基呋喃代谢物残留量的测定十分重要。本标准采用酶联免疫吸附法进行测定,具有灵敏度高、准确度高、操作简便等优点。
1.范围
本标准适用于猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅等动物源食品中硝基呋喃代谢物残留量的测定。
2.原理
将样品中的硝基呋喃代谢物与固定在微孔板上的抗硝基呋喃代谢物单克隆抗体结合,再加入辣根过氧化物酶标记的抗硝基呋喃代谢物单克隆抗体,形成夹心式免疫复合物。加入底物后,底物在酶的作用下发生显色反应,产生颜色。颜色的深浅与样品中硝基呋喃代谢物的浓度成正比。
3.试剂和材料
3.1 乙醇
3.2 磷酸盐缓冲液
3.3 硝基呋喃代谢物标准品
3.4 抗硝基呋喃代谢物单克隆抗体
3.5 辣根过氧化物酶标记的抗硝基呋喃代谢物单克隆抗体
3.6 底物
3.7 停止液
4.仪器设备
4.1 酶标仪
4.2 微孔板洗涤器
4.3 微孔板振荡器
4.4 称量器
4.5 移液器
5.样品处理
将样品加入磷酸盐缓冲液中,经过离心后取上清液进行测定。
6.操作步骤
6.1 取微孔板,加入抗硝基呋喃代谢物单克隆抗体,孵育30分钟。
6.2 弃去孵育液,加入样品和硝基呋喃代谢物标准品,孵育30分钟。
6.3 弃去孵育液,加入辣根过氧化物酶标记的抗硝基呋喃代谢物单克隆抗体,孵育30分钟。
6.4 弃去孵育液,加入底物,孵育15分钟。
6.5 加入停止液,测定吸光度值。
7.结果计算
根据标准曲线计算样品中硝基呋喃代谢物的浓度。
8.精密度和准确度
本方法的精密度和准确度符合要求。
相关标准:
GB/T 5009.199-2017 食品中硝基呋喃代谢物的测定 气相色谱-质谱法
GB/T 5009.198-2017 食品中硝基呋喃代谢物的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.197-2017 食品中硝基呋喃代谢物的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 5009.196-2017 食品中硝基呋喃代谢物的测定 液相色谱法
GB/T 5009.195-2017 食品中硝基呋喃代谢物的测定 高效液相色谱-荧光检测法