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空肠弯曲菌是一种常见的食源性病原菌,能够引起人类和动物的肠道感染。由于其易于在食品中存活和繁殖,因此对于出口食品的检测尤为重要。药物敏感性测试是评估抗生素治疗效果的重要手段,也是制定合理用药方案的基础。本标准旨在规范出口食品中空肠弯曲菌药物敏感性的测定方法,以保障食品安全和公共卫生。
1.范围
本标准适用于出口食品中空肠弯曲菌药物敏感性的测定,包括微量稀释法的操作步骤、结果判定和报告。
2.引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室用水质量规格和评价方法
GB/T 14683-2003 食品微生物学通则
GB/T 4789.2-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 检验方法 第2部分:肠道致病菌和有关微生物的检验
GB/T 4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 检验方法 第3部分:食品中真菌和酵母菌的检验
GB/T 4789.4-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 检验方法 第4部分:食品中耐热大肠杆菌的检验
3.术语和定义
本标准中使用的术语和定义与GB/T 14683-2003中的术语和定义相同。
4.试验原理
微量稀释法是一种常用的药物敏感性测试方法,其基本原理是将不同浓度的抗生素加入含有一定细菌数量的培养基中,观察不同浓度抗生素对细菌生长的影响,从而确定最小抑菌浓度(MIC)。
5.试验仪器和试剂
5.1 试验仪器
微量稀释板、多通道移液器、恒温培养箱、显微镜等。
5.2 试剂
含有不同浓度抗生素的培养基、生理盐水、甲醇等。
6.样品处理
按照GB/T 4789.2-2016中的方法进行样品处理。
7.试验步骤
7.1 制备菌液
按照GB/T 4789.2-2016中的方法制备菌液。
7.2 稀释菌液
将菌液用生理盐水稀释至适宜浓度。
7.3 制备微量稀释板
将含有不同浓度抗生素的培养基加入微量稀释板中。
7.4 加入菌液
将稀释后的菌液加入微量稀释板中。
7.5 培养
将微量稀释板放入恒温培养箱中,按照GB/T 4789.2-2016中的方法进行培养。
7.6 观察和记录
观察微量稀释板中各孔的生长情况,记录最小抑菌浓度(MIC)。
8.结果判定
8.1 最小抑菌浓度(MIC)是指能够抑制菌落生长的最低抗生素浓度。
8.2 根据MIC值,将菌株分为敏感、中度敏感和耐药三类。
9.报告
报告应包括以下内容:
9.1 样品名称、编号、来源等基本信息;
9.2 测定方法、试验条件等实验细节;
9.3 测定结果,包括MIC值和菌株敏感性分类;
9.4 结论和建议。
相关标准:
GB/T 6682 分析化学实验室用水质量规格和评价方法
GB/T 14683-2003 食品微生物学通则
GB/T 4789.2-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 检验方法 第2部分:肠道致病菌和有关微生物的检验
GB/T 4789.3-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 检验方法 第3部分:食品中真菌和酵母菌的检验
GB/T 4789.4-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 检验方法 第4部分:食品中耐热大肠杆菌的检验