一、范围
本标准适用于出口食品中磷脂的测定。
二、方法原理
样品中的磷脂经酸水解后,磷酸根与钼酸根在酸性条件下形成黄色复合物,其吸光度与磷脂的含量成正比。
三、仪器设备
1.分光光度计:波长范围为400~700nm,分辨率为1nm。
2.电热板:可调温度范围为0~100℃。
3.振荡器:振幅可调,频率为100次/min。
四、试剂
1.钼酸铵:粉末,AR级。
2.磷酸标准溶液:0.1mol/L。
3.硫酸:AR级。
4.氯仿:AR级。
5.乙醇:AR级。
6.氯化钠:AR级。
7.醋酸钠:AR级。
8.醋酸:AR级。
五、操作步骤
1.样品制备
取样品5g,加入50mL氯仿,振荡30min,离心10min,取上清液,加入50mL乙醇,振荡30min,离心10min,取上清液,蒸干残渣,加入5mL磷酸标准溶液,加热水浴至溶解,冷却至室温,定容至100mL,摇匀,过滤。
2.标准曲线的绘制
取0.1mol/L磷酸标准溶液,分别加入0、0.5、1、2、4、6、8、10mL,定容至10mL,摇匀,按上述操作步骤制备样品,分别测定吸光度,绘制标准曲线。
3.样品测定
按上述操作步骤制备样品,测定吸光度,根据标准曲线计算磷脂含量。
六、结果计算
样品中磷脂的含量,按下式计算:
磷脂含量(mg/kg)=(样品吸光度-空白吸光度)×标准曲线斜率×1000/样品质量
七、质量控制
1.标准曲线的线性范围为0~10mg/L,相关系数不小于0.999。
2.空白试验:按上述操作步骤制备空白样品,测定吸光度,其吸光度应小于0.01。
3.平行试验:同一样品应进行3次测定,其相对标准偏差不应大于5%。
八、报告内容
1.样品名称、编号、重量。
2.测定结果,包括磷脂含量、相对标准偏差。
3.分析方法的名称、编号、日期。
4.分析人员的姓名、日期。
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