SN/T 3858-2014
出口食品中异抗坏血酸的测定 高效液相色谱法
发布时间:2014-01-13 实施时间:2014-08-01


异抗坏血酸是一种重要的营养成分,具有抗氧化、抗衰老、增强免疫力等多种功效。因此,在出口食品中的含量也备受关注。本标准采用高效液相色谱法测定出口食品中异抗坏血酸的含量。

1. 原理
样品经提取后,经过色谱柱分离,异抗坏血酸在特定条件下与荧光素反应生成荧光素衍生物,通过荧光检测器检测荧光强度,计算出异抗坏血酸的含量。

2. 仪器和设备
(1)高效液相色谱仪
(2)荧光检测器
(3)色谱柱:C18色谱柱
(4)移液器、量筒、瓶塞、滤膜等

3. 试剂和材料
(1)异抗坏血酸标准品
(2)荧光素
(3)甲醇
(4)磷酸二氢钾
(5)磷酸氢二钠
(6)乙酸钠
(7)乙酸
(8)去离子水
(9)样品

4. 操作步骤
(1)样品制备:取适量样品,加入甲醇进行提取,离心后取上清液,过滤后即可使用。
(2)色谱条件设置:色谱柱为C18色谱柱,流动相为甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH=2.5)(95:5),流速为1.0mL/min。
(3)荧光检测器设置:激发波长为365nm,发射波长为440nm。
(4)标准曲线绘制:取异抗坏血酸标准品,分别加入荧光素和磷酸氢二钠,按照上述色谱条件进行检测,绘制标准曲线。
(5)样品检测:取适量样品,按照上述色谱条件进行检测,根据标准曲线计算出异抗坏血酸的含量。

5. 结果计算
异抗坏血酸的含量(mg/100g)=(样品峰面积/标准品峰面积)×标准品浓度×稀释倍数×100/样品质量

6. 精密度和准确度
本方法的相对标准偏差(RSD)不应大于5%,回收率应在95%~105%之间。

相关标准:
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