：
一、范围
本标准适用于食品接触材料中偶氮二甲酰胺的测定。

二、引用标准
GB/T 6682 分析化学实验室用水质量规格及评价方法
GB/T 5009.156 食品中偶氮二甲酰胺的测定 高效液相色谱法
GB/T 223.68 钢铁及合金化学分析方法 硫的测定 高碘酸铵-碘量滴定法
GB/T 223.69 钢铁及合金化学分析方法 硅的测定 钼酸铵光度法
GB/T 223.72 钢铁及合金化学分析方法 铜的测定 醋酸铵-乙酸锰分光光度法

三、原理
样品经加热提取后，经过净化处理后，采用高效液相色谱法进行测定。

四、仪器设备和试剂
4.1 仪器设备
高效液相色谱仪：包括泵、进样器、柱温箱、检测器等。
色谱柱：C18色谱柱，5μm，4.6mm×250mm。
移液器：1mL、5mL、10mL、20mL。
超声波清洗器：功率≥200W。
电子天平：分辨率0.1mg。
真空干燥器：温度≤60℃。
恒温水浴器：温度范围室温~100℃。
4.2 试剂
甲醇（色谱纯）。
乙腈（色谱纯）。
水（色谱纯）。
偶氮二甲酰胺（标准品）。
氯化钠（分析纯）。
硫酸（分析纯）。
氢氧化钠（分析纯）。
硝酸（分析纯）。
氯仿（色谱纯）。

五、样品的处理
5.1 样品的准备
将样品切成小块，粉碎后过筛，取适量样品称入瓶中，加入氯仿，摇匀，加入氯化钠，摇匀，静置分层，取上层液体，加入硫酸，摇匀，静置分层，取上层液体，加入氢氧化钠，调节pH值至7~8，加入硝酸，摇匀，静置分层，取上层液体，加入水，摇匀，静置分层，取上层液体，用氮气吹干，加入甲醇，摇匀，静置分层，取上层液体，用氮气吹干，加入乙腈，摇匀，静置分层，取上层液体，过滤，即为样品溶液。
5.2 样品的提取
将样品溶液加热提取，过滤，取上清液，用氮气吹干，加入甲醇，摇匀，静置分层，取上层液体，用氮气吹干，加入乙腈，摇匀，静置分层，取上层液体，过滤，即为样品提取液。

六、操作步骤
6.1 仪器的准备
6.1.1 色谱柱的准备
将色谱柱用甲醇洗涤，然后用水洗涤，最后用乙腈洗涤，使色谱柱表面干净。
6.1.2 移液器的准备
用甲醇洗涤移液器，然后用水洗涤，最后用乙腈洗涤，使移液器表面干净。
6.1.3 柱温箱的准备
将柱温箱温度设定为30℃。
6.1.4 检测器的准备
将检测器波长设定为230nm。
6.2 样品的测定
6.2.1 进样
用移液器将样品提取液进样到色谱柱中。
6.2.2 色谱条件
流动相：甲醇-水（70:30）。
流速：1.0mL/min。
柱温：30℃。
检测器：紫外检测器。
检测波长：230nm。
6.2.3 定量
用偶氮二甲酰胺标准品制备一系列浓度不同的标准溶液，进样测定，绘制标准曲线，计算样品中偶氮二甲酰胺的含量。

七、结果计算
样品中偶氮二甲酰胺的含量，按下式计算：
C=（A×V×D）/（ε×m）
式中：
C——样品中偶氮二甲酰胺的含量，mg/kg；
A——样品峰面积；
V——进样体积，μL；
D——稀释倍数；
ε——偶氮二甲酰胺的摩尔吸光系数，L/(mol·cm)，取230nm处的值为1.2×10^4；
m——样品质量，g。

八、质量控制
8.1 标准曲线的制备
用偶氮二甲酰胺标准品制备一系列浓度不同的标准溶液，进样测定，绘制标准曲线。
8.2 空白试验
用同样的方法进行操作，但不加入样品，测定空白试验。
8.3 平行试验
用同样的方法进行操作，但取同一样品的两个不同部位，测定平行试验。
8.4 加标回收试验
用同样的方法进行操作，向样品中加入一定量的偶氮二甲酰胺标准品，测定加标回收试验。

九、报告
报告中应包括以下内容：
9.1 样品的名称、编号、来源、采样日期、检测日期等；
9.2 分析结果，包括偶氮二甲酰胺的含量、相对标准偏差等；
9.3 分析方法的检出限、定量限等；
9.4 质量控制的结果；
9.5 分析过程中出现的问题及处理方法；
9.6 分析人员的签名。

相关标准：
GB/T 5009.156 食品中偶氮二甲酰胺的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.155 食品中偶氮二甲酰胺的测定 气相色谱法
GB/T 5009.157 食品中偶氮二甲酰胺的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 5009.158 食品中偶氮二甲酰胺的测定 液相色谱-紫外检测法
GB/T 5009.159 食品中偶氮二甲酰胺的测定 液相色谱-荧光检测法