SN/T 3979-2014
乳及乳制品中β-内酰胺酶的测定方法杯碟法
发布时间:2014-07-14 实施时间:2015-03-01
β-内酰胺酶是一种在乳及乳制品中广泛存在的酶类,其主要作用是水解β-内酰胺键,使乳脂肪酸从甘油酯中释放出来,从而影响乳制品的质量和口感。因此,对于乳及乳制品中β-内酰胺酶的测定具有重要意义。
本标准采用杯碟法测定乳及乳制品中β-内酰胺酶的含量。具体操作步骤如下:
1. 样品制备
将样品称取10g,加入50mL的0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0),在水浴中加热至70℃,保持10min,然后冷却至室温,离心10min,取上清液备用。
2. 标准品制备
取β-内酰胺酶标准品1mL,加入9mL的0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0),制成1mg/mL的标准溶液。
3. 杯碟法测定
将样品上清液和标准品溶液分别加入含有1%牛血清蛋白和1%琼脂糖的培养基中,混匀后倒入平板培养基中,用吸管在培养基表面形成小孔,分别加入10μL的β-内酰胺酶酶液和0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)作为对照,然后在37℃下培养24h。
4. 结果计算
观察培养基表面的透明圈,测量透明圈的直径,计算β-内酰胺酶的活性。
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