一、范围
本标准适用于出口保健食品中育亨宾、伐地那非、西地那非、他达那非的检测。

二、检测原理
样品经提取后，采用液相色谱-质谱/质谱法进行检测。

三、仪器设备和试剂
1. 液相色谱-质谱/质谱仪：具有电喷雾离子源、质谱分析器和色谱柱等部件。
2. 色谱柱：C18色谱柱，5μm，4.6mm×250mm。
3. 乙腈：色谱纯。
4. 纯水：超纯水或经膜过滤的去离子水。
5. 甲酸：色谱纯。
6. 乙酸：色谱纯。
7. 氨水：色谱纯。
8. 育亨宾、伐地那非、西地那非、他达那非标准品：纯度≥98%。

四、样品处理
1. 取样品1g，加入50mL甲醇，超声提取30min，离心10min，取上清液过滤。
2. 取上清液5mL，加入10mL甲醇，超声处理10min，离心10min，取上清液过滤。
3. 取上清液2mL，加入2mL纯水，pH值调至7.0-8.0，用0.22μm滤膜过滤。

五、色谱条件
1. 色谱柱：C18色谱柱，5μm，4.6mm×250mm。
2. 流动相：A液为0.1%甲酸水溶液，B液为乙腈。
3. 梯度洗脱程序：时间（min）/B液浓度（%）：0/10，5/90，10/90，11/10，15/10。
4. 流速：1.0mL/min。
5. 进样量：10μL。
6. 柱温：30℃。

六、质谱条件
1. 离子源：电喷雾离子源（ESI）。
2. 离子极性：正离子模式。
3. 离子扫描范围：m/z 100-500。
4. 离子源温度：120℃。
5. 气体流量：10L/min。
6. 气体压力：40psi。
7. 母离子选择：育亨宾 m/z 372.2，伐地那非 m/z 389.2，西地那非 m/z 475.2，他达那非 m/z 475.2。
8. 碎片电压：育亨宾 m/z 372.2→m/z 354.2，伐地那非 m/z 389.2→m/z 371.2，西地那非 m/z 475.2→m/z 457.2，他达那非 m/z 475.2→m/z 457.2。

七、结果计算
1. 育亨宾、伐地那非、西地那非、他达那非的质量浓度计算公式：
质量浓度（μg/g）=（样品峰面积/内标峰面积）×内标浓度×稀释倍数
2. 内标峰面积计算公式：
内标峰面积=内标峰高×内标峰宽
3. 内标浓度计算公式：
内标浓度（μg/mL）=内标标准品质量/体积

八、检测限和定量限
1. 检测限：育亨宾、伐地那非、西地那非、他达那非的检测限均为0.5μg/kg。
2. 定量限：育亨宾、伐地那非、西地那非、他达那非的定量限均为1.0μg/kg。

相关标准
GB/T 5009.33-2017 食品中药物残留量的测定 高效液相色谱-质谱/质谱法
GB/T 5009.199-2017 食品中西地那非的测定 液相色谱-质谱/质谱法
GB/T 5009.198-2017 食品中伐地那非的测定 液相色谱-质谱/质谱法
GB/T 5009.197-2017 食品中他达那非的测定 液相色谱-质谱/质谱法
GB/T 5009.199-2003 食品中西地那非的测定 液相色谱法