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一、范围
本标准适用于出口虾及虾干中吲哚含量的测定。
二、方法概述
本方法采用高效液相色谱法测定出口虾及虾干中吲哚含量。
三、仪器设备
1. 高效液相色谱仪
2. 色谱柱:C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)
3. 色谱柱温控箱
4. 紫外检测器
5. 称量器
6. 注射器
7. 蒸馏水纯化系统
四、试剂和材料
1. 吲哚标准品
2. 甲醇
3. 乙腈
4. 磷酸二氢钾
5. 蒸馏水
五、操作步骤
1. 标准曲线的制备
(1)取吲哚标准品0.1mg/mL的甲醇溶液,分别取0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL和1.0mL,加入10mL的甲醇中,用蒸馏水稀释至10mL,得到吲哚的浓度分别为0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.06mg/mL、0.08mg/mL和0.1mg/mL的标准溶液。
(2)将各标准溶液注入色谱柱中,以甲醇-乙腈(70:30)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为280nm,记录各峰面积,绘制吲哚标准曲线。
2. 样品的制备
取适量的出口虾或虾干样品,粉碎并过筛,取1g样品加入50mL甲醇中,超声提取30min,离心10min,取上清液过滤,用蒸馏水稀释至10mL,得到样品溶液。
3. 色谱分析
(1)将样品溶液注入色谱柱中,以甲醇-乙腈(70:30)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为280nm,记录各峰面积。
(2)根据吲哚标准曲线计算样品中吲哚的含量。
六、结果计算
样品中吲哚的含量(mg/kg)=样品中吲哚的峰面积/吲哚标准曲线的回归方程系数×样品质量(g)×1000
七、质量控制
1. 标准曲线的制备应每次测定前制备。
2. 样品的制备应避免光照和高温。
3. 每个样品应重复测定3次,取平均值作为结果。
相关标准:
1. GB/T 5009.124-2017 食品中吲哚的测定 高效液相色谱法
2. GB/T 5009.123-2017 食品中亚硝酸盐和亚硝胺的测定 高效液相色谱法
3. GB/T 5009.146-2016 食品中氨基酸的测定 高效液相色谱法
4. GB/T 5009.60-2003 食品中铅的测定 原子吸收分光光度法
5. GB/T 5009.268-2016 食品中镉的测定 原子吸收分光光度法