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牛凝血因子Ⅺ缺失症是一种常见的遗传性疾病，其发病率较高。为了准确、快速地检测牛凝血因子Ⅺ缺失症，保障牛育种的质量和安全，本标准制定了牛凝血因子Ⅺ缺失症巢式PCR检测方法。

1.适用范围
本标准适用于牛凝血因子Ⅺ缺失症的巢式PCR检测。

2.试剂和仪器
2.1 试剂
2.1.1 DNA提取试剂盒
2.1.2 PCR试剂盒
2.1.3 DNA Marker
2.1.4 蒸馏水
2.2 仪器
2.2.1 PCR仪
2.2.2 电泳仪

3.样品采集和DNA提取
3.1 样品采集
3.1.1 采集牛血样
3.1.2 采集牛毛发样
3.2 DNA提取
3.2.1 根据DNA提取试剂盒说明书进行DNA提取

4.巢式PCR反应
4.1 PCR反应条件
4.1.1 第一步PCR反应
4.1.2 第二步PCR反应
4.2 PCR反应程序
4.2.1 第一步PCR反应程序
4.2.2 第二步PCR反应程序

5.电泳分析
5.1 准备电泳仪
5.2 加载PCR产物
5.3 电泳条件
5.4 结果分析

6.结果判定
6.1 阳性判定
6.2 阴性判定

7.质量控制
7.1 实验室内质量控制
7.2 实验室间质量控制

相关标准：
GB/T 21415-2008 牛基因组DNA提取试剂盒
GB/T 21416-2008 牛巢式PCR试剂盒
GB/T 21417-2008 牛DNA Marker
GB/T 21418-2008 牛血样采集方法
GB/T 21419-2008 牛毛发样采集方法