蜂蜜是一种天然的食品，具有营养丰富、口感独特等特点，深受人们的喜爱。但是，由于蜜源植物的不同，蜂蜜的成分也会有所不同。为了保证出口蜂蜜的质量和安全，需要对蜂蜜中的蜜源植物成分进行检测。本标准介绍了一种检测出口蜂蜜中荆条成分的方法。

实时荧光PCR法
实时荧光PCR技术是一种高灵敏度、高特异性的分子生物学检测方法，可以快速、准确地检测样品中的DNA序列。该技术利用荧光探针与PCR扩增产物结合，通过检测荧光信号的强度来确定样品中目标DNA序列的存在与否。实时荧光PCR技术具有灵敏度高、特异性好、快速、准确等优点，已经广泛应用于食品安全、医学诊断、环境监测等领域。

荆条
荆条是一种常见的蜜源植物，其花期一般在5月至6月间，花期较短，但花期内开花密度较大，是蜜蜂采集蜜源的重要植物之一。荆条蜜呈淡黄色至深黄色，味道清甜，口感细腻，是一种优质的蜜源。

检测方法
本标准采用实时荧光PCR技术，通过检测荆条DNA序列的特异性，确定蜂蜜中荆条的存在与否。具体操作步骤如下：

1. 样品制备：取出口蜂蜜样品5g，加入50mL离心管中，加入50mL去离子水，振荡混合均匀，离心10min，取上清液备用。

2. DNA提取：取上清液1mL，加入离心管中，加入200μL提取液，振荡混合均匀，离心5min，取上清液加入DNA纯化柱中，离心1min，弃去流出液，加入500μL洗涤缓冲液，离心1min，弃去流出液，再加入500μL洗涤缓冲液，离心1min，弃去流出液，离心管离心1min，将DNA纯化柱放入新的离心管中，加入50μL去离子水，离心1min，收集DNA溶液备用。

3. PCR扩增：将PCR反应体系按照表1配置，加入荧光探针，混合均匀，放入实时荧光PCR仪中，进行PCR扩增。PCR程序如下：95℃预变性2min，95℃变性15s，60℃退火30s，共40个循环。

4. 数据分析：将实时荧光PCR仪的数据导出，进行数据分析，根据荧光信号的强度，确定样品中荆条的存在与否。

相关标准
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- GB/T 5009.201-2017 食品中重金属的测定 原子吸收光谱法
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