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卡萨诺尔森林病病毒是一种由蚊子传播的病毒，可引起人类和动物的疾病。该病毒在全球范围内广泛分布，特别是在热带和亚热带地区。为了防止该病毒的传播和流行，需要对其进行快速、准确的检测。本标准提供了一种可靠的检测方法，可用于国境口岸的卫生检疫和疫情监测。

1. 适用范围
本标准适用于国境口岸卡萨诺尔森林病病毒实时荧光RT-PCR检测方法。

2. 术语和定义
本标准中使用的术语和定义与GB/T 14233.1-2008《标准化工作指南 第1部分：标准的结构和编写》相一致。

3. 原理
本方法采用实时荧光RT-PCR技术，利用特异性引物和探针扩增和检测卡萨诺尔森林病病毒的核酸。该方法具有高灵敏度、高特异性、高稳定性等优点。

4. 试剂和材料
4.1 试剂
4.1.1 RNA提取试剂盒
4.1.2 反转录试剂盒
4.1.3 实时荧光PCR试剂盒
4.1.4 质控品
4.2 材料
4.2.1 无菌离心管
4.2.2 无菌移液器
4.2.3 实时荧光PCR仪

5. 仪器
5.1 实时荧光PCR仪
5.2 离心机
5.3 恒温水浴器
5.4 超净工作台

6. 操作步骤
6.1 样品采集和处理
6.2 RNA提取
6.3 反转录
6.4 实时荧光PCR扩增和检测
6.5 数据分析

7. 结果判定
7.1 阳性判定
7.2 阴性判定
7.3 无效判定

8. 精密度和准确度
8.1 精密度
8.2 准确度

9. 检测限和灵敏度
9.1 检测限
9.2 灵敏度

10. 特异性
10.1 试验菌株
10.2 结果判定

11. 重复性
11.1 同一实验室内重复性
11.2 不同实验室间重复性

12. 保存和贮存
12.1 试剂和材料的保存和贮存
12.2 实验室环境的要求

相关标准：
GB/T 14233.1-2008 标准化工作指南 第1部分：标准的结构和编写
GB/T 14233.2-2005 标准化工作指南 第2部分：标准的编写规则
GB/T 14233.3-2005 标准化工作指南 第3部分：标准的编写规则
GB/T 14233.4-2005 标准化工作指南 第4部分：标准的编写规则
GB/T 14233.5-2005 标准化工作指南 第5部分：标准的编写规则