DNA条形码是一种基于分子生物学和遗传学的物种鉴定方法，通过对物种特定的DNA序列进行测定和比对，可以快速、准确地鉴定物种。一品红亚属是一类重要的植物资源，具有重要的经济和生态价值。本标准旨在规定一品红亚属物种DNA条形码的测定方法，为一品红亚属物种的鉴定和保护提供技术支持。

1.范围
本标准适用于一品红亚属物种的DNA条形码测定。

2.引用标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室用水质要求和检验方法
GB/T 14233.1-2008 环境试验 第1部分：通用和导则
GB/T 14233.2-2005 环境试验 第2部分：试验方法
GB/T 14233.3-2005 环境试验 第3部分：支持文献
GB/T 14233.4-2005 环境试验 第4部分：试验设备

3.术语和定义
3.1 一品红亚属
指属于番杏科一品红属（Impatiens L.）下的亚属，包括多种植物。

3.2 DNA条形码
指一种基于物种特定DNA序列的分子生物学方法，通过对该序列进行测定和比对，可以快速、准确地鉴定物种。

3.3 样品采集
指从自然环境中采集一品红亚属植物样品，包括叶片、花、果实等。

3.4 DNA提取
指从一品红亚属植物样品中提取DNA，包括样品处理、细胞破碎、DNA纯化等步骤。

3.5 PCR扩增
指通过聚合酶链式反应（PCR）对一品红亚属植物样品中的DNA进行扩增，以获得目标DNA序列。

3.6 测序
指对PCR扩增产物进行测序，以获得目标DNA序列。

3.7 序列编辑和分析
指对测序获得的DNA序列进行编辑和分析，包括序列比对、物种鉴定等步骤。

4.样品采集
4.1 样品采集应在一品红亚属植物生长期内进行，采集时应选择健康、完整的植物组织，避免受到污染和损伤。
4.2 样品采集后应立即进行DNA提取，或者将样品冷冻保存。

5.DNA提取
5.1 样品处理
将采集的一品红亚属植物样品进行清洗、消毒和去除杂质等处理，以获得干净、完整的植物组织。
5.2 细胞破碎
将样品切碎或磨碎，加入细胞破碎液，进行细胞破碎。
5.3 DNA纯化
通过离心、过滤等步骤，将DNA纯化并溶解于适当的缓冲液中。

6.PCR扩增
6.1 PCR反应体系
PCR反应体系应包括模板DNA、引物、酶、缓冲液和其他试剂。
6.2 引物设计
引物应设计在一品红亚属物种特异的DNA序列上，以保证PCR扩增的特异性和准确性。
6.3 PCR反应条件
PCR反应条件应根据引物设计和模板DNA的特性进行优化，包括反应温度、反应时间、循环次数等。

7.测序
7.1 测序方法
测序方法应选择高通量测序技术，如Illumina测序技术等。
7.2 测序质量控制
测序前应对PCR产物进行质量控制，包括检测PCR产物的浓度、大小和纯度等。
7.3 测序数据处理
测序数据应进行质量控制和序列拼接，以获得高质量的DNA序列。

8.序列编辑和分析
8.1 序列编辑
对测序获得的DNA序列进行编辑，包括去除低质量序列、修剪序列末端等步骤。
8.2 序列比对
将编辑后的DNA序列与已知的一品红亚属物种DNA序列进行比对，以鉴定物种。
8.3 物种鉴定
根据序列比对结果，对一品红亚属物种进行鉴定。

相关标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室用水质要求和检验方法
GB/T 14233.1-2008 环境试验 第1部分：通用和导则
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GB/T 14233.4-2005 环境试验 第4部分：试验设备