棉花黄萎病是由黄萎病菌引起的一种严重的病害，对棉花生产造成了很大的危害。为了防止病害的传播，需要对棉花及其种子进行检疫鉴定。本标准就是为了规范棉花黄萎病菌检疫鉴定方法而制定的。

1.范围
本标准适用于棉花及其种子中棉花黄萎病菌的检疫鉴定。

2.样品采集
样品应在棉花生长期间采集，采集时应选择病株或疑似病株，避免选择健康的棉花。样品应采集根、茎、叶、花和种子等部位，每个部位应采集3-5个样品，合并成一份样品。

3.样品处理
样品应在采集后24小时内送检，送检前应将样品表面的泥土、杂质等清除干净，然后用70%的酒精消毒30秒，再用蒸馏水冲洗3次，每次冲洗时间为1分钟。

4.分离
将样品分别切成小块，然后在无菌条件下，将样品放入含有10%的蔗糖的无菌蒸馏水中，振荡1小时，然后将悬浮液过滤，过滤液用无菌蒸馏水洗涤3次，每次洗涤时间为1分钟。将过滤液均匀涂布在含有10%蔗糖的无菌琼脂平板上，放置在28℃下培养3-5天。

5.鉴定
在培养好的菌落中，挑选单个菌落，进行形态学鉴定和生理生化鉴定。形态学鉴定包括菌落形态、菌丝形态、孢子形态等；生理生化鉴定包括氧化酶试验、卟啉试验、葡萄糖氧化试验等。

相关标准
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