本标准采用液相色谱-质谱/质谱法测定出口肉及肉制品中甲硝唑、替硝唑、奥硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑、塞克硝唑残留量。该方法具有高灵敏度、高选择性、高准确度、高重现性等优点，可用于出口肉及肉制品中甲硝唑、替硝唑、奥硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑、塞克硝唑残留量的测定。

1 范围
本标准适用于猪肉、牛肉、羊肉、禽肉及其制品中甲硝唑、替硝唑、奥硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑、塞克硝唑残留量的测定。

2 原理
样品经乙腈提取，经固相萃取柱净化后，采用液相色谱-质谱/质谱法测定甲硝唑、替硝唑、奥硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑、塞克硝唑残留量。

3 试剂和材料
3.1 甲硝唑、替硝唑、奥硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑、塞克硝唑标准品。
3.2 乙腈（色谱纯）。
3.3 水（色谱纯）。
3.4 固相萃取柱。
3.5 氮气。
3.6 1.5 mL离心管。
3.7 0.22 μm滤膜。
3.8 量筒、移液管、瓶塞等。

4 仪器设备
4.1 液相色谱-质谱/质谱仪。
4.2 离心机。
4.3 超声波清洗器。
4.4 恒温振荡器。
4.5 氮吹仪。
4.6 称量器。

5 样品的处理
5.1 样品的准备
取样品1 g，加入15 mL乙腈，超声波处理10 min，振荡摇匀5 min，离心10 min，取上清液过0.22 μm滤膜，取滤液1 mL，加入1.5 mL离心管中，氮吹至干燥，加入1 mL水，振荡摇匀5 min，离心10 min，取上清液过0.22 μm滤膜，取滤液1 mL，即可进入下一步操作。

5.2 样品的平行试验
在样品的准备过程中，每个样品均应进行平行试验，以检验方法的可靠性。

6 操作步骤
6.1 标准曲线的制备
取甲硝唑、替硝唑、奥硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑、塞克硝唑标准品，分别加入1 mL水中，制成1 mg/L的标准溶液，再分别稀释成0.1、0.01、0.001、0.0001 mg/L的标准溶液，用于制备标准曲线。

6.2 样品的测定
取样品的处理液1 mL，注入液相色谱-质谱/质谱仪中，按照仪器操作说明进行测定。

7 数据处理
7.1 标准曲线的绘制
将标准曲线的峰面积与浓度进行线性回归，得到标准曲线方程。

7.2 样品中甲硝唑、替硝唑、奥硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑、塞克硝唑的测定
将样品中甲硝唑、替硝唑、奥硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑、塞克硝唑的峰面积代入标准曲线方程，计算出其浓度，再乘以样品的稀释倍数，即可得到样品中甲硝唑、替硝唑、奥硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑、塞克硝唑的含量。

8 结果表述
样品中甲硝唑、替硝唑、奥硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑、塞克硝唑的含量应按照实际测定值报告，单位为mg/kg。

9 精密度和准确度
9.1 精密度
在同一天内，对同一样品进行6次测定，计算相对标准偏差（RSD），RSD不应大于10%。

9.2 准确度
在同一天内，对同一样品进行6次测定，计算平均值，与标准值进行比较，平均值应与标准值相符合。

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