蜂蜜是一种天然的食品，具有多种营养成分，其中游离氨基酸是蜂蜜中重要的营养成分之一。游离氨基酸是构成蛋白质的基本组成部分，也是人体必需的营养物质。因此，测定蜂蜜中游离氨基酸的含量对于评价蜂蜜的品质和营养价值具有重要意义。

本标准采用高效液相色谱-荧光检测法测定蜂蜜中18种游离氨基酸的含量。该方法具有灵敏度高、准确度高、重现性好等优点，能够有效地测定蜂蜜中游离氨基酸的含量。

具体操作步骤如下：

1.样品制备

将蜂蜜样品称取1g，加入10mL的0.1mol/L盐酸溶液中，加热至70℃，搅拌30min，冷却至室温，用0.22μm的微孔过滤膜过滤，取上清液备用。

2.标准曲线制备

取18种氨基酸的标准品，分别加入0.1mol/L盐酸溶液中，制备浓度为0.1mg/mL的标准溶液。将标准溶液进行稀释，制备出一系列不同浓度的标准溶液，用于制备标准曲线。

3.色谱条件

使用C18色谱柱，流动相为甲醇-0.1%三氟乙酸水溶液（V/V，15:85），流速为1.0mL/min，柱温为40℃。

4.荧光检测条件

荧光检测器的激发波长为340nm，发射波长为450nm。

5.测定方法

将样品和标准溶液注入高效液相色谱仪中，按照色谱条件进行分离，通过荧光检测器检测游离氨基酸的含量。根据标准曲线计算出样品中游离氨基酸的含量。

相关标准
GB/T 5009.7-2016 食品中氨基酸的测定
GB/T 17891-1999 蜂蜜
GB/T 18979-2003 食品中氨基酸的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.124-2003 食品中氨基酸的测定 高效液相色谱法
GB/T 22388-2008 食品中氨基酸的测定 高效液相色谱法