对虾急性肝胰腺坏死病是一种由病毒引起的急性传染病，主要危害对虾养殖业。为了保障对虾产品的质量安全，防止疫病传播，本标准制定了对虾急性肝胰腺坏死病的检疫技术规范。

1. 范围
本标准适用于对虾急性肝胰腺坏死病的检疫工作。

2. 规定
2.1 样品采集
2.1.1 采样时间：对虾急性肝胰腺坏死病的病原体在对虾体内的分布不均匀，因此采样时间应选择在对虾发病高峰期进行。
2.1.2 采样方法：采用无菌手套、无菌器具等无菌操作，从对虾的肝胰腺组织中取样，每个样品重量不少于5g。
2.1.3 样品保存：采样后应立即将样品放入冰袋中，运输至实验室进行检测。

2.2 检测方法
2.2.1 样品处理：将样品加入PBS缓冲液中，离心沉淀后取上清液进行检测。
2.2.2 PCR检测：采用PCR技术检测对虾急性肝胰腺坏死病的病原体，PCR反应条件为：95℃预变性5min，95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，共35个循环。
2.2.3 RT-PCR检测：采用RT-PCR技术检测对虾急性肝胰腺坏死病的病原体，RT-PCR反应条件为：50℃反转录30min，95℃预变性5min，95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，共35个循环。

2.3 结果判定
2.3.1 PCR检测结果：阳性样品应出现特异性条带，阴性样品不出现条带。
2.3.2 RT-PCR检测结果：阳性样品应出现特异性条带，阴性样品不出现条带。

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