SN/T 5180-2021
微小病媒生物无损伤制备基因组DNA方法
发布时间:2021-06-18 实施时间:2022-01-01


微小病媒生物是指体长小于3mm的昆虫、蜱、螨等节肢动物,它们是许多疾病的传播媒介,如疟疾、登革热、黄热病等。对微小病媒生物的研究需要获取其基因组DNA,但由于其体积小、数量少、难以采集,传统的DNA提取方法往往会对其造成损伤,影响后续的PCR扩增和测序。因此,本标准制定了一种无损伤制备微小病媒生物基因组DNA的方法。

1. 样品采集
样品采集应在微小病媒生物活动期间进行,采集前应先麻醉或冷冻样品,以避免其在采集过程中逃逸或死亡。采集器具应消毒并使用无菌工具进行采集,避免污染。

2. DNA提取
DNA提取应使用适当的试剂盒或自制缓冲液,根据样品数量和质量选择不同的提取方法。提取过程中应注意避免样品受到机械损伤或温度变化,以保证DNA的完整性。

3. DNA纯化
DNA纯化应使用适当的纯化试剂盒或自制缓冲液,根据DNA提取的方法选择不同的纯化方法。纯化过程中应注意避免DNA受到机械损伤或温度变化,以保证DNA的完整性。

4. DNA浓缩
DNA浓缩应使用适当的方法,如乙醇沉淀、硅胶柱纯化等。浓缩过程中应注意避免DNA受到机械损伤或温度变化,以保证DNA的完整性。

5. PCR扩增和测序
经过上述步骤制备的微小病媒生物基因组DNA可以用于PCR扩增和测序。PCR扩增应根据需要选择适当的引物和PCR条件,测序应使用高质量的测序仪器和试剂盒。

相关标准
- GB/T 19495-2004 微生物学实验室通用要求
- GB/T 21415-2008 生物技术实验室通用要求
- GB/T 21416-2008 生物技术实验室质量控制
- GB/T 21417-2008 生物技术实验室技术规范
- GB/T 21418-2008 生物技术实验室安全规范