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恙虫病是由恙螨传播的一种人畜共患病，严重威胁人类健康和动物养殖业的发展。为了保障国境口岸的动植物检疫安全，需要对进出口动物和动物产品进行恙虫病检测。本标准旨在规范国境口岸恙虫病东方体实时荧光PCR检测方法，提高检测准确性和可靠性。

1. 要求
本标准适用于国境口岸恙虫病东方体实时荧光PCR检测方法。检测结果应准确、可靠、重复性好，检测灵敏度应达到10个拷贝/反应。检测过程中应采取严格的质量控制措施，确保检测结果的准确性和可靠性。

2. 试剂
试剂应符合国家相关标准或行业标准，试剂盒应包括PCR反应体系、引物和探针、模板DNA、阳性对照和负性对照等。试剂应保存在干燥、阴凉、避光的环境中，避免冻结和高温。

3. 仪器设备
实时荧光PCR仪应符合国家相关标准或行业标准，具有准确、可靠、重复性好的特点。仪器应定期进行校准和维护，确保检测结果的准确性和可靠性。

4. 操作程序
操作程序应包括样品处理、DNA提取、PCR反应、结果分析等步骤。操作人员应具有相关的专业知识和技能，严格按照操作程序进行操作。在操作过程中应采取严格的质量控制措施，确保检测结果的准确性和可靠性。

5. 结果判定
根据实时荧光PCR仪的结果，判断样品是否为恙虫病东方体阳性。阳性样品应进行二次检测，确保检测结果的准确性和可靠性。

6. 质量控制
在检测过程中应采取严格的质量控制措施，包括阳性对照、负性对照、内部对照等。阳性对照应包括恙虫病东方体DNA，负性对照应包括无模板对照。内部对照应包括内参基因等。

7. 报告
检测结果应及时、准确地报告给相关部门和单位。报告应包括样品编号、检测结果、检测日期、检测人员等信息。

相关标准：
1. GB/T 4789.40-2016 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
2. GB/T 5009.33-2016 食品中亚硝酸盐和亚硝胺的测定 高效液相色谱法
3. GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范
4. SN/T 0800-2011 食品中农药残留量的测定 气相色谱法
5. SN/T 2064-2008 食品中重金属元素的测定 石墨炉原子吸收光谱法