蓝莓是一种重要的经济作物，但蓝莓焦枯病毒的感染会导致蓝莓的减产和死亡。为了保障蓝莓产业的健康发展，需要对蓝莓进行病毒检测和检疫鉴定。本标准就是为了规范蓝莓焦枯病毒的检疫鉴定方法。

1 范围
本标准适用于蓝莓焦枯病毒的检疫鉴定。

2 规定
2.1 样品采集
2.1.1 样品采集时间
蓝莓焦枯病毒的检测应在蓝莓生长期内进行，最好在蓝莓开花前采集样品。
2.1.2 样品采集方法
采集蓝莓叶片或果实，每个样品应包括3-5个叶片或果实。
2.1.3 样品保存
采集后的样品应立即放入冰箱或冷藏库中保存，不得超过24小时。

2.2 样品处理
2.2.1 样品处理方法
将采集的样品放入离心管中，加入PBS缓冲液，离心10分钟，将上清液倒入新的离心管中，即为样品处理液。
2.2.2 样品处理液保存
样品处理液应立即放入冰箱或冷藏库中保存，不得超过24小时。

2.3 RNA提取
2.3.1 RNA提取试剂盒
使用RNA提取试剂盒进行RNA提取。
2.3.2 RNA提取步骤
按照RNA提取试剂盒说明书进行RNA提取。

2.4 RT-PCR扩增
2.4.1 RT-PCR试剂盒
使用RT-PCR试剂盒进行RT-PCR扩增。
2.4.2 RT-PCR扩增步骤
按照RT-PCR试剂盒说明书进行RT-PCR扩增。

2.5 PCR产物检测
2.5.1 PCR产物检测方法
将RT-PCR扩增产物进行凝胶电泳检测。
2.5.2 PCR产物检测结果判定
如果PCR产物出现了目标条带，则样品为阳性；如果PCR产物未出现目标条带，则样品为阴性。

相关标准
GB/T 31654-2015 植物病毒检疫鉴定方法
GB/T 31655-2015 植物病毒检测方法
GB/T 31656-2015 植物病毒检测试剂盒
GB/T 31657-2015 植物病毒检测仪器
GB/T 31658-2015 植物病毒检测质量控制