车前草花叶病毒是一种重要的植物病毒，能够感染多种植物，如番茄、辣椒、烟草等，引起严重的经济损失。为了防止该病毒的传播和扩散，需要对植物进行检疫鉴定。本标准规定了车前草花叶病毒检疫鉴定的PCR和ELISA方法。

1. PCR方法
1.1 试剂和设备
PCR试剂盒、PCR仪、电泳仪等。
1.2 样品处理
将植物样品切碎，加入提取液中，经过离心、振荡、冷冻等步骤，提取出RNA。
1.3 PCR反应
将提取的RNA加入PCR反应体系中，进行PCR扩增。PCR反应条件如下：
预变性：95℃，5min
循环：95℃，30s；55℃，30s；72℃，30s，共35个循环
终变性：72℃，10min
1.4 电泳分析
将PCR产物进行电泳分析，检测是否存在车前草花叶病毒。

2. ELISA方法
2.1 试剂和设备
ELISA试剂盒、酶标仪等。
2.2 样品处理
将植物样品切碎，加入提取液中，经过离心、振荡、冷冻等步骤，提取出病毒。
2.3 ELISA反应
将提取的病毒加入ELISA反应板中，进行ELISA检测。ELISA反应条件如下：
孵育：37℃，1h
洗涤：洗涤缓冲液洗涤3次
检测：加入底物，孵育30min
终止：加入终止液
2.4 酶标仪检测
将反应板放入酶标仪中，检测是否存在车前草花叶病毒。

相关标准
GB/T 28469-2012 植物病毒检疫鉴定方法
GB/T 28470-2012 植物病毒检疫鉴定试剂
GB/T 28471-2012 植物病毒检疫鉴定设备
GB/T 28472-2012 植物病毒检疫鉴定质量控制
GB/T 28473-2012 植物病毒检疫鉴定报告