SN/T 5486-2022
塞内卡病毒病检疫技术规范
发布时间:2022-07-07 实施时间:2023-02-01


塞内卡病毒病是由塞内卡病毒引起的一种急性传染病,主要通过蚊子叮咬传播。为了防止该病的传播,需要对可能携带病毒的样品进行检测和处理。本标准旨在规范塞内卡病毒病检疫的技术要求,确保检测结果的准确性和可靠性。

1.样品处理
1.1 血清样品处理
血清样品应在2-8℃下保存,避免反复冻融。在检测前,应将血清样品离心,去除悬浮的颗粒物质。如血清样品中含有红细胞,应先进行离心去除红细胞。

1.2 组织样品处理
组织样品应在-70℃以下保存,避免反复冻融。在检测前,应将组织样品切成小块,加入PBS缓冲液中,进行均质处理。均质后,应离心去除悬浮的颗粒物质。

2.检测方法
2.1 RT-PCR检测方法
采用RT-PCR方法检测塞内卡病毒病的样品。具体操作步骤如下:
(1)提取RNA:将样品中的RNA提取出来,用于后续的PCR反应。
(2)RT-PCR反应:将提取的RNA进行逆转录反应,得到cDNA。然后进行PCR扩增反应,得到PCR产物。
(3)结果分析:将PCR产物进行凝胶电泳分析,判断是否存在塞内卡病毒病的阳性结果。

2.2 ELISA检测方法
采用ELISA方法检测塞内卡病毒病的样品。具体操作步骤如下:
(1)制备抗原:将塞内卡病毒病的抗原制备出来,用于后续的ELISA反应。
(2)ELISA反应:将样品加入含有抗原的孔板中,进行反应。然后加入特异性抗体,进行二次反应。最后加入底物,进行显色反应。
(3)结果分析:根据显色反应的强度,判断样品是否存在塞内卡病毒病的阳性结果。

3.结果判定
3.1 RT-PCR检测结果判定
RT-PCR检测结果为阳性时,应进行二次PCR反应,确认结果的准确性。同时,应进行序列分析,确定病毒的亚型和基因型。

3.2 ELISA检测结果判定
ELISA检测结果为阳性时,应进行二次ELISA反应,确认结果的准确性。同时,应进行Western blot分析,确定病毒的特异性。

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