蛋白质是生物体内重要的有机物质，是构成细胞的基本物质之一。在木质纤维素类生物质原料中，蛋白质含量的测定对于生物质的利用和加工具有重要意义。本标准规定了木质纤维素类生物质原料中蛋白质的测定方法。

1. 原理
将样品中的蛋白质与试剂反应，生成紫色化合物，根据紫色化合物的吸光度测定样品中蛋白质的含量。

2. 试剂和仪器
2.1 试剂
(1) Na2CO3：分析纯。
(2) CuSO4·5H2O：分析纯。
(3) Na-K塞尔维亚液：含Na2CO3 1.0 g/L，CuSO4·5H2O 0.5 g/L，Na-K塞尔维亚液pH为10.0。
(4) BSA标准溶液：浓度为1.0 mg/mL。
2.2 仪器
(1) 分光光度计：波长范围为500 nm至600 nm，量程为0.1至1.0。
(2) 离心机：最高转速为3000 r/min。

3. 样品的制备
将样品粉碎并筛选至60目，取适量样品称重，加入适量Na-K塞尔维亚液，振荡混合，放置30 min，离心10 min，取上清液进行测定。

4. 操作步骤
4.1 制备标准曲线
取BSA标准溶液0.1 mL，加入Na-K塞尔维亚液10 mL，混合均匀，放置30 min，测定吸光度A1。分别取0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL BSA标准溶液，加入Na-K塞尔维亚液10 mL，混合均匀，放置30 min，测定吸光度A2、A3、A4、A5、A6。以BSA标准溶液的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
4.2 测定样品
取适量上清液，加入Na-K塞尔维亚液10 mL，混合均匀，放置30 min，测定吸光度A。根据标准曲线计算样品中蛋白质的含量。

5. 结果的计算
样品中蛋白质的含量（mg/g）=（A - A0）/A1 × C × V/m
其中，A为样品的吸光度，A0为空白对照的吸光度，A1为标准曲线上对应吸光度的BSA标准溶液的浓度，C为BSA标准溶液的浓度（mg/mL），V为样品的体积（mL），m为样品的质量（g）。

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