:
白蜡是一种重要的工业原料,广泛应用于化妆品、医药、食品、润滑油等领域。白蜡的品种繁多,传统的鉴定方法主要依靠形态学特征和化学成分分析,但这些方法存在着误判率高、操作复杂等问题。因此,开发一种快速、准确、可靠的白蜡品种分子鉴定方法具有重要意义。
SRAP(Sequence-Related Amplified Polymorphism)分子标记法是一种基于PCR扩增的分子标记技术,具有高度多态性、高通量、高重复性等优点,已广泛应用于植物、动物、微生物等领域。本标准采用SRAP分子标记法对白蜡品种进行鉴定,具体步骤如下:
1. 样品的处理:选取新鲜的白蜡叶片或芽,用无菌水清洗干净,晾干后放入密封袋中保存。
2. DNA提取:采用CTAB法提取白蜡DNA,纯化后测定DNA浓度和纯度。
3. PCR扩增:选取适当的引物对进行PCR扩增,反应体系包括模板DNA、引物、dNTPs、Taq DNA聚合酶等,PCR反应条件为:94℃预变性5min,94℃变性30s,50℃退火30s,72℃延伸1min,共35个循环,72℃延伸10min。
4. 电泳分离:将PCR产物进行电泳分离,根据分离结果进行数据分析。
5. 数据分析:根据PCR产物的大小和带型进行聚类分析,建立白蜡品种的分子鉴定图谱。
本标准的实施可以提高白蜡品种鉴定的准确性和可靠性,为白蜡的生产和应用提供技术支持。
相关标准:
GB/T 20428-2006 植物基因组DNA提取试剂盒
GB/T 20429-2006 植物基因组DNA提取试剂盒
GB/T 20430-2006 植物基因组DNA提取试剂盒
GB/T 20431-2006 植物基因组DNA提取试剂盒
GB/T 20432-2006 植物基因组DNA提取试剂盒