一、范围
本标准规定了花椒及花椒加工产品中花椒酰胺总含量的测定方法。

二、引用标准
GB/T 601-2018 食品添加剂 食品用氧化钙
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及实验室用水纯度的试验方法
GB/T 6688-2008 分析化学实验室安全规程
GB/T 8170-2008 数值舍入规则及其在计算中的应用
GB/T 14683-2011 食品中农药最大残留限量

三、原理
样品中的花椒酰胺在碱性条件下水解生成对应的花椒酸，花椒酸在紫外光下有吸收，其最大吸收波长为280nm。根据花椒酸在280nm处的吸光度与标准品花椒酸的吸光度比较，计算出样品中花椒酰胺总含量。

四、仪器设备
紫外分光光度计：工作波长范围为190nm~1100nm，分辨率为1nm。

五、试剂和材料
5%氢氧化钠溶液：称取5g氢氧化钠，加入100mL蒸馏水中，搅拌至溶解，定容至1000mL。
0.1mol/L盐酸溶液：取3.65mL盐酸，加入1000mL蒸馏水中，搅拌均匀。
花椒酸标准品：精确称取约10mg花椒酸，加入100mL蒸馏水中，摇匀，定容至1000mL，得到1mg/mL的花椒酸标准溶液。
样品：经过研磨、筛选后的花椒或花椒加工产品。

六、操作步骤
1.取样品约1g，精确称取，加入50mL 5%氢氧化钠溶液中，加盖，放置于60℃水浴中加热2h，冷却至室温。
2.将溶液转移至100mL容量瓶中，用0.1mol/L盐酸溶液调节pH值至7.0~7.5，定容至刻度线。
3.取1mL上述溶液，加入10mL蒸馏水中，用紫外分光光度计测定吸光度A1。
4.取1mL花椒酸标准品溶液，加入10mL蒸馏水中，用紫外分光光度计测定吸光度A2。
5.计算样品中花椒酰胺总含量（mg/kg）：
样品中花椒酰胺总含量（mg/kg）=（A1/A2）×C×V/m
其中，A1为样品溶液的吸光度，A2为花椒酸标准品溶液的吸光度，C为花椒酸标准品溶液的浓度（mg/mL），V为样品溶液的体积（mL），m为样品质量（g）。

七、结果计算与表达
保留两位小数，计算结果向上取整至整数。

八、质量控制
1.标准品的制备和保存应符合GB/T 6682-2008和GB/T 14683-2011的要求。
2.每个批次样品应至少测定3次，计算平均值。
3.如样品中花椒酰胺总含量超过本标准规定的最大限值，应重新取样复测，如仍超过限值，则该批次样品不合格。

九、标准限值
花椒及花椒加工产品中花椒酰胺总含量的最大限值为100mg/kg。

相关标准
GB/T 601-2018 食品添加剂 食品用氧化钙
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范及实验室用水纯度的试验方法
GB/T 6688-2008 分析化学实验室安全规程
GB/T 8170-2008 数值舍入规则及其在计算中的应用
GB/T 14683-2011 食品中农药最大残留限量