玫瑰茄红色素是一种天然色素，广泛应用于食品、化妆品、药品等领域。为了保证产品质量，需要对玫瑰茄红色素的含量进行测定。本标准采用高效液相色谱法进行测定，具有准确、快速、灵敏等特点。

1.范围
本标准适用于玫瑰茄红色素的含量测定。

2.仪器和设备
2.1 高效液相色谱仪
2.2 色谱柱：C18色谱柱
2.3 称量仪
2.4 超声波清洗仪
2.5 离心机

3.试剂和材料
3.1 玫瑰茄红色素标准品
3.2 甲醇
3.3 磷酸二氢钾
3.4 乙腈
3.5 纯水

4.操作步骤
4.1 标准曲线的制备
4.1.1 取玫瑰茄红色素标准品0.1mg/mL的甲醇溶液，分别取1mL、2mL、3mL、4mL、5mL，加入5mL的甲醇中，制备出浓度分别为0.02mg/mL、0.04mg/mL、0.06mg/mL、0.08mg/mL、0.1mg/mL的标准溶液。
4.1.2 取5个不同浓度的标准溶液各1mL，加入5mL的甲醇中，制备出浓度分别为0.004mg/mL、0.008mg/mL、0.012mg/mL、0.016mg/mL、0.02mg/mL的标准曲线溶液。
4.2 样品的制备
4.2.1 取待测样品1g，加入10mL的甲醇中，超声波清洗10min，离心10min，取上清液。
4.2.2 取上清液1mL，加入5mL的甲醇中，超声波清洗10min，离心10min，取上清液。
4.3 色谱条件
4.3.1 色谱柱：C18色谱柱
4.3.2 流动相：A相为0.05%磷酸二氢钾水溶液，B相为乙腈
4.3.3 梯度洗脱：0-5min，A相：B相=90:10；5-10min，A相：B相=80:20；10-15min，A相：B相=70:30；15-20min，A相：B相=60:40；20-25min，A相：B相=50:50；25-30min，A相：B相=40:60；30-35min，A相：B相=30:70；35-40min，A相：B相=20:80；40-45min，A相：B相=10:90；45-50min，A相：B相=0:100
4.3.4 流速：1.0mL/min
4.3.5 检测波长：530nm
4.4 样品的测定
4.4.1 取5个不同浓度的标准曲线溶液各20μL，注入色谱仪中，记录峰面积。
4.4.2 取样品溶液20μL，注入色谱仪中，记录峰面积。
4.5 计算
4.5.1 标准曲线的绘制
以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
4.5.2 样品的含量计算
根据样品的峰面积和标准曲线，计算出样品中玫瑰茄红色素的含量。

5.结果的表示
结果应该以mg/kg为单位表示。

相关标准
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