蜂蜜是一种天然的食品，具有多种营养成分和药用价值。其中甘油是一种重要的成分，其含量的测定对于蜂蜜的质量控制和营养价值评估具有重要意义。本标准采用高效液相色谱法进行蜂蜜中甘油含量的测定。

1. 原理
样品经过提取、过滤、稀释后，采用高效液相色谱法进行分析。甘油在特定条件下与内标物一起进入色谱柱进行分离，通过检测器检测后得到峰面积，计算出甘油的含量。

2. 仪器和设备
（1）高效液相色谱仪
（2）色谱柱：C18色谱柱
（3）移液器、量筒、瓶塞、滤膜等

3. 试剂和材料
（1）甘油标准品
（2）内标物：2,3-丁二醇
（3）甲醇、乙腈、水等
（4）蜂蜜样品

4. 操作步骤
（1）样品制备：取适量蜂蜜样品，加入甲醇进行提取，过滤后稀释至适宜浓度。
（2）色谱条件设置：色谱柱为C18色谱柱，流动相为甲醇-水（70:30），流速为1.0 mL/min，检测波长为210 nm。
（3）内标物添加：取适量内标物加入样品中。
（4）进样：将样品注入进样器中，进行进样。
（5）检测：启动高效液相色谱仪进行检测，记录峰面积。
（6）计算：根据甘油标准品的峰面积和浓度，计算出样品中甘油的含量。

5. 结果计算
样品中甘油的含量（mg/kg）=（样品中甘油的峰面积/内标物的峰面积）×（内标物的浓度/样品的质量）×1000

6. 精密度和准确度
本方法的相对标准偏差（RSD）应小于10%。

7. 相关标准
GB/T 5009.7-2016 食品中甘油的测定 气相色谱法
GB/T 5009.8-2016 食品中甘油的测定 高效液相色谱法
GB/T 18932.32-2002 蜂蜜中甘油含量的测定
GB/T 18932.33-2002 蜂蜜中糖醛酸含量的测定
GB/T 18932.34-2002 蜂蜜中葡萄糖含量的测定