蜂蜜是一种天然的食品，具有多种营养成分和药用价值。苦参碱和氧化苦参碱是蜂蜜中的重要成分之一，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性。因此，准确测定蜂蜜中苦参碱和氧化苦参碱含量对于保障蜂蜜质量和开发蜂蜜的药用价值具有重要意义。

本标准采用液相色谱-串联质谱法进行测定。具体操作步骤如下：

1. 样品制备

取适量蜂蜜样品，加入等体积的甲醇，振荡混合，离心沉淀，取上清液过滤，用氮气吹干，加入甲醇重溶，制备成浓度为1 mg/mL的样品溶液。

2. 色谱条件

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18柱（2.1 mm×50 mm，1.8 μm）

流动相A：0.1%甲酸水溶液

流动相B：乙腈

梯度洗脱程序：0-0.5 min，5% B；0.5-2.5 min，5%-95% B；2.5-3.5 min，95% B；3.5-3.6 min，95%-5% B；3.6-5.0 min，5% B

流速：0.3 mL/min

柱温：40℃

进样量：5 μL

3. 质谱条件

离子源：电喷雾离子源（ESI）

离子极性：正离子模式

离子化电压：4000 V

气体温度：350℃

气体流量：10 L/min

碰撞能量：35 eV

4. 数据处理

采用多反应监测（MRM）模式进行定量分析，以m/z 203.1→160.1和m/z 219.1→176.1为监测离子对，建立标准曲线，计算样品中苦参碱和氧化苦参碱的含量。

相关标准
GB/T 5009.33-2017 食品中苦参碱的测定 高效液相色谱法

GB/T 5009.34-2017 食品中氧化苦参碱的测定 高效液相色谱法

GB/T 18979-2003 蜂蜜

GB/T 23569-2009 蜂蜜中氨基酸的测定 气相色谱法

GB/T 23763-2009 蜂蜜中糖的测定 高效液相色谱法