WS/T 67-1996
全血胆碱酯酶活性的分光光度测定法 硫代乙酰胆碱—联硫代双硝基苯甲酸法
发布时间:1996-10-14 实施时间:1997-05-01


一、范围
本标准规定了全血胆碱酯酶活性的分光光度测定法,适用于临床检验中全血胆碱酯酶活性的测定。

二、方法概述
将硫代乙酰胆碱加入含有胆碱酯酶的全血中,胆碱酯酶催化硫代乙酰胆碱水解生成硫代乙酸和胆碱,硫代乙酸与联硫代双硝基苯甲酸反应生成黄色产物,其吸光度与胆碱酯酶活性成正比。

三、仪器和试剂
1.分光光度计:波长范围为400~500nm,光程为1cm。
2.离心机:转速为3000r/min。
3.试管:直径为16mm,长度为150mm。
4.试剂:
(1)硫代乙酰胆碱:纯度为≥98%。
(2)联硫代双硝基苯甲酸:纯度为≥98%。
(3)0.9%氯化钠溶液。
(4)0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)。

四、操作步骤
1.取全血标本,离心10min,取上清液。
2.将上清液与0.9%氯化钠溶液按1:1的比例混合,得到稀释液。
3.取试管,加入2.5ml稀释液和0.5ml硫代乙酰胆碱,混匀。
4.在37℃恒温水浴中孵育10min。
5.加入2.5ml联硫代双硝基苯甲酸,混匀。
6.在37℃恒温水浴中孵育10min。
7.加入2.5ml0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4),混匀。
8.测定吸光度,以0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)为对照液。

五、计算
1.计算样本吸光度值:样本吸光度值=测定值-对照值。
2.计算胆碱酯酶活性:胆碱酯酶活性=样本吸光度值/标准吸光度值×标准胆碱酯酶活性。

六、结果报告
报告胆碱酯酶活性值,单位为U/L。

七、质量控制
1.日常质量控制:每天测定2个质控品,应符合质控范围。
2.内部质量控制:每月测定1次内部质控品,应符合质控范围。

相关标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范
GB/T 191-2008 化学分析方法通用规定
GB/T 6682-1992 分析化学实验室用水质量