尿中σ-氨基乙酰丙酸是一种代谢产物，可以反映人体蛋白质代谢的情况。本标准适用于尿液中σ-氨基乙酰丙酸的定量测定。

1. 原理
尿中σ-氨基乙酰丙酸与2,4-二硝基苯肼在酸性条件下反应生成紫色化合物，其吸收峰位于540nm处。根据比色法测定尿中σ-氨基乙酰丙酸的含量。

2. 试剂和仪器
2.1 试剂
（1）2,4-二硝基苯肼：纯度为99%以上。
（2）硫酸：纯度为98%以上。
（3）氢氧化钠：纯度为98%以上。
（4）乙醇：纯度为95%以上。
（5）去离子水。
2.2 仪器
（1）分光光度计：波长范围为320nm~1000nm，分辨率为1nm。
（2）移液管、量筒、烧杯等。

3. 操作步骤
3.1 标准曲线的制备
（1）取0.1gσ-氨基乙酰丙酸粉末，加入100mL去离子水中，摇匀，称取10mL，加入50mL的1mol/L HCl中，加热至沸腾，冷却后定容至100mL，得到100μg/mL的σ-氨基乙酰丙酸标准溶液。
（2）取0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL和1.0mL的标准溶液，分别加入6个烧杯中，加入2mL的1mol/L HCl，加热至沸腾，冷却后定容至10mL，得到10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL和100μg/mL的标准溶液。
（3）将6个标准溶液分别置于分光光度计中，测定吸光度值，绘制标准曲线。

3.2 样品的处理
（1）取尿液5mL，加入10mL的1mol/L HCl中，加热至沸腾，冷却后定容至50mL。
（2）取1mL的样品溶液，加入10mL的1mol/L HCl中，加热至沸腾，冷却后定容至50mL。

3.3 测定
（1）将标准溶液和样品溶液分别置于分光光度计中，测定吸光度值。
（2）根据标准曲线计算样品中σ-氨基乙酰丙酸的含量。

4. 结果计算
样品中σ-氨基乙酰丙酸的含量（μg/mL）=（样品吸光度值-空白吸光度值）/标准曲线斜率

5. 精密度和准确度
5.1 精密度
同一样品在同一天内测定6次，相对标准偏差不大于5%。
5.2 准确度
加入已知量的σ-氨基乙酰丙酸标准溶液，测定回收率，回收率在95%~105%之间。

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