WS/T 54-1996
尿中苯乙醛酸和苯乙醇酸的高效液相色谱测定方法
发布时间:1996-10-14 实施时间:1997-05-01


1.范围
本标准适用于尿中苯乙醛酸和苯乙醇酸的测定。

2.仪器和设备
2.1 高效液相色谱仪
2.2 色谱柱:C18色谱柱,4.6mm×250mm,5μm
2.3 称量仪
2.4 超声波清洗仪
2.5 离心机

3.试剂和材料
3.1 苯乙醛酸和苯乙醇酸标准品
3.2 甲醇
3.3 磷酸二氢钾
3.4 乙腈
3.5 离子交换树脂
3.6 水

4.操作步骤
4.1 标准曲线的制备
4.1.1 取苯乙醛酸和苯乙醇酸标准品各10mg,分别溶于10mL甲醇中,制备1mg/mL的标准溶液。
4.1.2 取1mL标准溶液,加入9mL甲醇,制备0.1mg/mL的标准溶液。
4.1.3 取0.1mg/mL的标准溶液,分别加入0、2、4、6、8、10μL,制备6个不同浓度的标准溶液。
4.1.4 将6个标准溶液注入高效液相色谱仪,按照以下条件进行分析:流速为1.0mL/min,检测波长为254nm,柱温为25℃,进样量为20μL。
4.1.5 记录峰面积与浓度的关系,绘制标准曲线。

4.2 样品的制备
4.2.1 取尿样10mL,加入0.1g离子交换树脂,超声波清洗10min,离心10min,取上清液。
4.2.2 取上清液1mL,加入9mL甲醇,超声波清洗10min,离心10min,取上清液。

4.3 样品的分析
4.3.1 将样品注入高效液相色谱仪,按照以下条件进行分析:流速为1.0mL/min,检测波长为254nm,柱温为25℃,进样量为20μL。
4.3.2 记录峰面积,根据标准曲线计算出样品中苯乙醛酸和苯乙醇酸的含量。

5.结果的计算
5.1 标准曲线的计算
标准曲线的方程为:y=ax+b,其中y为峰面积,x为浓度,a为斜率,b为截距。
5.2 样品中苯乙醛酸和苯乙醇酸的含量计算
样品中苯乙醛酸和苯乙醇酸的含量分别为:C=(y-b)/a,其中y为样品的峰面积,a和b为标准曲线的斜率和截距。

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