尿中硫氰酸盐是一种重要的生化指标，其含量的测定对于临床诊断和治疗具有重要意义。本标准采用砒啶-巴比妥酸分光光度法测定尿中硫氰酸盐的含量。

1. 原理
尿中硫氰酸盐与砒啶在酸性条件下反应生成红色络合物，其最大吸收波长为515nm。本方法利用分光光度计测定络合物的吸光度，根据标准曲线计算出尿中硫氰酸盐的含量。

2. 试剂和仪器
2.1 试剂
(1) 砒啶-巴比妥酸试剂：将0.1g砒啶和0.1g巴比妥酸分别溶解于100mL 95%乙醇中，混合后用95%乙醇定容至1000mL。
(2) 硫氰酸钾标准溶液：精密称取硫氰酸钾，加入去离子水中溶解并定容至1000mL，浓度为0.1mol/L。
(3) 硫酸：纯化后的浓硫酸。
(4) 去离子水：电阻率大于18MΩ/cm的水。
2.2 仪器
(1) 分光光度计：选择波长范围为400-700nm的分光光度计。
(2) 恒温水浴：可控制温度在25℃±1℃的水浴。

3. 操作步骤
3.1 标准曲线的制备
(1) 取硫氰酸钾标准溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL分别置于6个10mL的量筒中，用去离子水定容至10mL，得到6个不同浓度的硫氰酸钾溶液。
(2) 分别加入2mL砒啶-巴比妥酸试剂，用去离子水定容至10mL，混匀后静置10min。
(3) 用分光光度计在515nm处测定吸光度，绘制标准曲线。

3.2 样品的测定
(1) 取尿液5mL，加入1mL浓硫酸，加热至沸腾，使尿液中的硫氰酸盐分解为氰化物。
(2) 冷却后用去离子水定容至10mL，分别加入2mL砒啶-巴比妥酸试剂，用去离子水定容至10mL，混匀后静置10min。
(3) 用分光光度计在515nm处测定吸光度，根据标准曲线计算出尿中硫氰酸盐的含量。

4. 结果计算
4.1 标准曲线的计算
(1) 绘制标准曲线，以硫氰酸钾的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标。
(2) 用线性回归方程计算出标准曲线的斜率和截距。
4.2 样品的计算
(1) 用分光光度计测定样品的吸光度。
(2) 根据标准曲线计算出样品中硫氰酸盐的含量。

相关标准
GB/T 6682-2008 水质-用电导率法测定水中总溶解固体和离子浓度的标准方法
GB/T 5750-2006 水质标准
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