对氨基酚是一种非处方药，常用于缓解头痛、发热等症状。然而，对氨基酚的滥用会对人体造成危害，因此需要对其在尿液中的含量进行监测。本标准提供了一种高效液相色谱测定尿中对氨基酚的方法。

1. 原理
将尿样中的对氨基酚经过萃取、洗脱、浓缩后，通过高效液相色谱进行分离和检测。检测波长为254nm。

2. 仪器和设备
2.1 高效液相色谱仪
2.2 恒温振荡器
2.3 离心机
2.4pH计
2.5 称量器具

3. 试剂和材料
3.1 对氨基酚标准品
3.2 甲醇
3.3 乙腈
3.4 氯仿
3.5 硫酸
3.6 氢氧化钠
3.7 氯化钠
3.8 磷酸二氢钾
3.9 磷酸氢二钠
3.10 纯水

4. 操作步骤
4.1 取尿样10mL，加入10mL氯仿，振荡10min，离心分离。
4.2 取上清液5mL，加入5mL 0.1mol/L氢氧化钠溶液，调节pH至9.0。
4.3 加入5mL 0.1mol/L磷酸二氢钾溶液，调节pH至6.0。
4.4 加入5mL 0.1mol/L磷酸氢二钠溶液，调节pH至3.0。
4.5 加入5mL甲醇，振荡10min，离心分离。
4.6 取上清液5mL，加入5mL乙腈，振荡10min，离心分离。
4.7 取上清液1mL，加入1mL纯水，混匀。
4.8 取适量样品进行高效液相色谱检测。

5. 结果计算
5.1 用对氨基酚标准品制备一系列浓度不同的标准曲线。
5.2 用标准曲线计算样品中对氨基酚的含量。

6. 精密度和准确度
6.1 精密度：同一实验室内，重复测定10次，相对标准偏差不大于2%。
6.2 准确度：加标回收率在98%~102%之间。

相关标准
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