WS/T 40-1996
尿中2-硫代噻唑烷-4-羧酸的高效液相色谱测定方法
发布时间:1996-10-14 实施时间:1997-05-01


2-硫代噻唑烷-4-羧酸(4-Mercapturic acid,4-MA)是一种重要的代谢产物,可用于评估人体暴露于环境污染物的程度。本标准适用于尿液中2-硫代噻唑烷-4-羧酸的测定。

1. 原理
样品经加热处理后,用高效液相色谱法分离,检测器采用紫外检测器,以2-硫代噻唑烷-4-羧酸的峰面积计算浓度。

2. 仪器和设备
2.1 高效液相色谱仪
2.2 紫外检测器
2.3 称量仪
2.4 恒温水浴器
2.5 超声波清洗器

3. 试剂和材料
3.1 2-硫代噻唑烷-4-羧酸标准品
3.2 甲醇
3.3 磷酸二氢钾
3.4 磷酸氢二钠
3.5 氢氧化钠
3.6 氯仿
3.7 硫酸
3.8 水

4. 样品处理
4.1 取尿液10ml,加入1ml 10%氢氧化钠溶液,加热至沸腾,保持沸腾5min。
4.2 冷却至室温,加入1ml 6mol/L硫酸,混匀。
4.3 加入5ml 氯仿,振荡5min,离心分离。
4.4 取上层氯仿液,加入1g 磷酸二氢钾,混匀,过滤。
4.5 取过滤液,加入1g 磷酸氢二钠,混匀,调节pH至7.0。
4.6 用甲醇定容至10ml,混匀,过滤。

5. 色谱条件
5.1 色谱柱:C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)
5.2 流动相:甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(30:70)
5.3 流速:1.0ml/min
5.4 柱温:30℃
5.5 检测波长:210nm

6. 标准曲线的绘制
6.1 取2-硫代噻唑烷-4-羧酸标准品,按样品处理方法处理,制备不同浓度的标准溶液。
6.2 用高效液相色谱法测定各标准溶液的峰面积,绘制标准曲线。

7. 样品的测定
7.1 按样品处理方法处理样品。
7.2 用高效液相色谱法测定样品的峰面积,根据标准曲线计算样品中2-硫代噻唑烷-4-羧酸的浓度。

相关标准
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范
GB/T 6688-2008 分析化学实验室安全规范
GB/T 6689-2008 分析化学实验室通用规范
GB/T 6690-2008 分析化学实验室玻璃器皿规范
GB/T 6691-2008 分析化学实验室药品规范