一、范围
本标准适用于尿中马尿酸、甲基马尿酸的高效液相色谱测定。

二、仪器设备
1. 高效液相色谱仪
2. 色谱柱：C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）
3. 紫外检测器：波长为254nm
4. 称量仪、移液器、注射器等

三、试剂和材料
1. 马尿酸、甲基马尿酸标准品
2. 甲醇：色谱纯
3. 磷酸二氢钾：分析纯
4. 磷酸氢二钠：分析纯
5. 离子交换水：制备纯

四、操作步骤
1. 标准曲线的制备
取一系列浓度不同的马尿酸、甲基马尿酸标准品，分别加入10ml离子交换水中，制备出一系列浓度不同的标准溶液。
2. 样品的制备
取尿液10ml，加入10ml离子交换水中，振荡混合，离心10min，取上清液。
3. 色谱条件
流动相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液（pH=2.5）（30:70）
流速：1.0ml/min
检测波长：254nm
进样量：20μl
4. 色谱分离
将标准溶液和样品分别注入色谱柱中，进行色谱分离。
5. 数据处理
根据标准曲线计算出样品中马尿酸、甲基马尿酸的含量。

五、结果表示
样品中马尿酸、甲基马尿酸的含量，以mg/L表示。

六、质量控制
1. 标准品的制备应严格按照标准要求进行。
2. 色谱柱的使用应符合要求，避免柱损坏或污染。
3. 操作过程中应注意卫生，避免污染。

相关标准
1. GB/T 5009.5-2016 食品中尿素、马尿酸、肌酸、肌酸磷酸的测定 高效液相色谱法
2. GB/T 22220-2008 饲料中马尿酸、尿素、肌酸、肌酸磷酸的测定 高效液相色谱法
3. GB/T 22221-2008 饲料中甲基马尿酸的测定 高效液相色谱法
4. WS/T 52-1996 尿中肌酸、肌酸磷酸的高效液相色谱测定方法
5. WS/T 54-1996 尿中尿素的高效液相色谱测定方法