尿中肌酐是评价肾功能的重要指标之一，其测定方法有多种，其中分光光度法是一种常用的方法。本标准参照国际标准方法，结合国内实际情况，制定了适用于我国的尿中肌酐分光光度测定方法。

1. 范围
本标准适用于尿中肌酐的分光光度测定。

2. 原理
将尿样中的肌酐与钼酸在酸性条件下反应生成紫色化合物，其吸收峰位在530nm处，根据比色法测定其吸光度值，再根据标准曲线计算出尿中肌酐的含量。

3. 仪器和设备
3.1 分光光度计：选择波长范围为400-700nm的分光光度计。
3.2 定量移液器：量程为0.1-1.0ml。
3.3 恒温水浴器：温度范围为25-40℃。
3.4 离心机：转速为3000r/min。

4. 试剂和材料
4.1 钼酸铵：AR级。
4.2 硫酸：AR级。
4.3 氯化钾：AR级。
4.4 氢氧化钠：AR级。
4.5 氯仿：AR级。
4.6 尿样：新鲜尿样。

5. 操作步骤
5.1 标准曲线的制备
5.1.1 取一定量的肌酐标准品，加入一定量的氯仿，制成肌酐标准溶液。
5.1.2 取不同浓度的肌酐标准溶液，分别加入一定量的钼酸铵、硫酸和氯化钾，制成标准曲线。
5.2 样品的处理
5.2.1 取适量的尿样，离心去除杂质。
5.2.2 取适量的尿样，加入一定量的钼酸铵、硫酸和氯化钾，混匀后放置恒温水浴器中反应。
5.3 测定吸光度值
5.3.1 将反应液移入分光光度计比色皿中，以纯水为对照，测定吸光度值。
5.3.2 根据标准曲线计算出尿中肌酐的含量。

6. 结果计算
6.1 标准曲线的绘制
将不同浓度的肌酐标准溶液的吸光度值与其浓度值绘制成标准曲线。
6.2 样品的测定
根据标准曲线计算出样品中尿中肌酐的含量。

7. 精密度和准确度
7.1 精密度
同一实验室内，重复测定同一尿样10次，计算其标准偏差，其相对标准偏差应小于2%。
7.2 准确度
将同一尿样分别送至不同实验室进行测定，计算其平均值和标准偏差，其相对标准偏差应小于5%。

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