α-淀粉酶是一种能够水解淀粉的酶，广泛应用于食品、饲料、纺织、造纸等行业。α-淀粉酶的催化活性浓度是评价其酶解效果的重要指标之一。本标准参考了国际标准方法，结合国内实际情况，制定了适用于我国的α-淀粉酶催化活性浓度测定方法。

1. 原理
α-淀粉酶催化淀粉水解生成糖，糖与3,5-二硝基水杨酸反应生成黄色产物，其吸光度与催化活性浓度成正比。

2. 试剂和仪器
2.1 试剂
（1）淀粉溶液：1%（质量分数）淀粉溶液。
（2）3,5-二硝基水杨酸：0.1%（质量分数）3,5-二硝基水杨酸乙醇溶液。
（3）磷酸盐缓冲液：pH 6.9，含0.1 mol/L磷酸二氢钾和0.1 mol/L磷酸氢二钠。
（4）α-淀粉酶：活性浓度应在10~100 U/mL之间。
2.2 仪器
分光光度计、恒温水浴器、离心机、pH计等。

3. 操作步骤
3.1 样品制备
将α-淀粉酶稀释至适当浓度，用磷酸盐缓冲液稀释淀粉溶液至适当浓度，混合后在恒温水浴器中孵育一定时间，停止反应后离心沉淀，取上清液进行测定。

3.2 样品测定
取一定量上清液加入3,5-二硝基水杨酸乙醇溶液，混合后在恒温水浴器中孵育一定时间，加入磷酸盐缓冲液停止反应，用分光光度计测定吸光度值。

3.3 建立标准曲线
取一定量α-淀粉酶，用磷酸盐缓冲液稀释至不同浓度，按照上述方法进行测定，建立标准曲线。

4. 结果计算
根据标准曲线计算样品的催化活性浓度。

5. 结果表示
催化活性浓度的单位为U/mL。

相关标准
GB/T 23528-2009 食品添加剂 α-淀粉酶
GB/T 23529-2009 饲料添加剂 α-淀粉酶
GB/T 23530-2009 纺织助剂 α-淀粉酶
GB/T 23531-2009 造纸助剂 α-淀粉酶
GB/T 23532-2009 工业酶 α-淀粉酶