血清中碘是评价人体碘营养状况的重要指标之一。本标准采用砷铈催化分光光度法测定血清中碘的含量,具有灵敏度高、准确度高、操作简便等优点。
1. 原理
样品中的碘与砷铈酸钾在酸性条件下反应生成紫色络合物,络合物的吸收峰位在410nm处,其吸光度与碘的浓度成正比关系。
2. 试剂和仪器
2.1 试剂
(1) 砷铈酸钾溶液:称取砷酸钾10g和硝酸铈(IV) 10g,加入水中溶解,定容至1000mL,摇匀后过滤,保存在棕色玻璃瓶中。
(2) 硫酸:质量浓度为1mol/L。
(3) 碘标准溶液:称取精制碘0.1g,加入氢氧化钠溶液,加热溶解,冷却后定容至1000mL,摇匀后保存在棕色玻璃瓶中。
(4) 氢氧化钠溶液:质量浓度为10mol/L。
(5) 氯仿:纯度为99%。
(6) 乙醇:纯度为95%。
2.2 仪器
(1) 分光光度计:选择波长为410nm。
(2) 恒温水浴器:温度控制范围为25℃±0.5℃。
3. 操作步骤
3.1 样品处理
取血清样品1mL,加入硫酸0.2mL,加热至沸腾,使样品中的碘转化为无机碘,冷却后加入氢氧化钠溶液0.2mL,使样品呈碱性,加入氯仿1mL,摇匀后离心,取上清液备用。
3.2 建立标准曲线
取碘标准溶液0.1mL、氢氧化钠溶液0.2mL、氯仿1mL,加入砷铈酸钾溶液2mL,摇匀后静置5min,用乙醇定容至10mL,混匀后,用分光光度计测定吸光度,建立标准曲线。
3.3 测定样品
取上清液1mL,加入氢氧化钠溶液0.2mL、氯仿1mL,加入砷铈酸钾溶液2mL,摇匀后静置5min,用乙醇定容至10mL,混匀后,用分光光度计测定吸光度,根据标准曲线计算样品中碘的含量。
4. 结果计算
样品中碘的含量,按下式计算:
C = (A-B)/a
其中,C为样品中碘的含量,μg/L;
A为样品的吸光度;
B为空白的吸光度;
a为标准曲线斜率,μg/L。
5. 精密度和准确度
5.1 精密度
在同一实验室内,重复测定同一样品6次,计算相对标准偏差,不得大于10%。
5.2 准确度
在同一实验室内,测定3个不同浓度的碘标准溶液,计算相对误差,不得大于10%。
相关标准
GB/T 5009.177-2016 食品中碘的测定 砷铈催化分光光度法
GB/T 5009.254-2016 食品中碘的测定 离子选择性电极法
GB/T 22388-2008 食品中碘的测定 气相色谱法
GB/T 22387-2008 食品中碘的测定 原子荧光光谱法
GB/T 22386-2008 食品中碘的测定 比色法